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COA
已发表文献
翌圣生物通过对Cas9经过点突变（D10A和H840A突变）获得dCas9（deactivated Cas9）。不同于Cas9，dCas9仅有结合靶标DNA的能力，不能切割靶标DNA，可用于转录水平调控研究（体内）。在体外，dCas9可以用来调取特异靶标序列，可用于后续的实验研究。与Cas9一样，dCas9的反应体系也需要添加RNA（sgRNA或者crRNA:tracrRNA），因此，整个体系（包括Cas9酶）都不能含有任何核酸酶。
产品信息
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货号 |
11351ES65/11351ES80 |
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规格 |
100 pmol / 1000 pmol |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
11351ES65 |
11351ES80 |
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11351-A |
dCas9 Nuclease（10 μM） |
100 pmol |
1000 pmol |
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11351-B |
10× dCas9 Nuclease Reaction Buffer |
1 mL |
1 mL |
注意：
a. dCas9 Nuclease浓度为10 μM，即10 pmol/μL，100 pmol规格总体积为10 μL，1000 pmol总体积为100 μL；
储存条件
-25~-15℃储存，有效期2年。
使用说明
在无菌微量离心管中配制以下反应体系：
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组分 |
20 μL反应体系 |
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Nuclease-free water |
Up to 20 μL |
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10 X Cas9 Nuclease Reaction Buffer |
2 μL（1 X） |
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10 μM sgRNA |
1.5 μL (750 nM final) |
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10 μM dCas9 Nuclease |
1.5 μL (750 nM final) |
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1 μM substrate DNA |
3 μL (150 nM final) |
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Total reaction volume |
20 μL |
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Incubate at 37 °C for 30min ~1 hour and proceed with fragment analysis |
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注意事项
- 为防止 RNase 污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。
- 因反应需添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA : tracrRNA)，整个体系，包括 dCas9 酶都必需不含任何 RNase 活性。本产品经过严格质控，无任何其它核酸酶污染。
- dCas9 酶对热敏感，容易失活，应全程冰上配置反应体系，使用后立即置于-20℃保存。
- 本产品仅作科研用途。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20230407
