产品简介

ArCas12a核酸内切酶，源自Agathobacter rectalis细菌的CRISPR系统，别名Cpf1，是一个包含1263个氨基酸的单体蛋白。作为CRISPR/Cas系统的II类（V型）成员，ArCas12a仅由单一的效应蛋白行使功能，其特性与Cas9存在显著差异,例如靶向富含T的基序、不需要反式激活crRNA、DNA双链断裂产生粘性末端、参与RNA加工、具有DNA核酸酶活性等。

Cas12a缺乏HNH结构域，可单独利用其RuvC结构域在CRISPR RNA（crRNA）引导下识别位于靶标核酸5’端富含胸腺嘧啶（T）的PAM区而启动对靶标DNA的切割，已成功用于许多哺乳动物和植物的基因组编辑。此外Cas12a还具有反式切割活性，可不加选择地切割反应体系中的非靶标单链DNA。

与其它LbCas12a/AsCas12a相比，ArCas12a具有更高的温度适应性（25-55℃），可适用于基因组编辑及核酸检测等。

 

产品信息

货号	14702ES65 / 14702ES80
规格	100 pmol / 1000 pmol
来源	大肠杆菌表达的来源于Agathobacter rectalis的Cpf1基因
分子量	149 KDa
PAM区	TTTN或TTTV
酶保存液	20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5 @25℃
反应条件	50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2 , pH 7.9 @25℃
浓度	10 µM*
纯度	>95%（SDS-PAGE）
失活条件	85℃，5-10 min

*: ArCas12a Nuclease浓度为10 μM，即10 pmol/μL。

 

组分信息

组分编号	组分名称	14702ES65	14702ES80
14702-A	ArCas12a Nuclease (10 μM)	10 μL	100 μL
14702-B	10×ArCas12a Reaction Buffer	1 mL	1 mL

 

产品应用

1. CRISPR/Cas基因编辑；

2. 基于CRISPR/Cas系统的诊断和检测；

3. 联合核酸等温扩增技术（RPA和LAMP)的其他检测应用等。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

1. 推荐配置应用反应与体系：

组分	体积
10×Arcas12a Reaction Buffer	3 μL
300 nM crRNA	3 μL (30 nM final)
1 μ MArcas12a Nuclease	1 μL (30 nM final)
Reaction volume	27 μL
30 nM substrate DNA	3 μL (3 nM final)
Nuclease-free water up to	30 μL

2. 在37℃下孵育1小时，然后在85℃下进行5-10分钟以灭活Arcas12a Nuclease，随后进行琼脂糖凝胶电泳以进行片段分析。

 

注意事项

1. 为防止RNase污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。

2. 避免反复冻融。首次溶解之后，建议按照使用量分装保存。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途。

 

Ver.CN20240318