AapCas12b核酸酶（又名C2c1）是由tracrRNA:crRNA（或sgRNA）介导的DNA核酸内切酶，来源于嗜酸耐热菌Alicyclobacillus acidophilus，在靶标双链DNA存在PAM（TTN）序列的情况下，特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成粘性末端。AapCas12b可不依赖PAM序列特异地剪切单链DNA靶标。双链或单链DNA靶标均能激活AapCas12b的反式剪切活性（即旁路剪切活性/附属剪切活性），即当AapCas12b酶与sgRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后，便会被激活针对非特异序列ssDNA的反式剪切活性，将体系中的任意序列ssDNA切碎。AapCas12b最佳剪切反应温度为60℃，比AacCas12b更耐高温，适用于与LAMP联用，开发恒温扩增/CRISPR-Cas检测体系。

• 顺势切割活性：效果媲美进口品牌T*；
• 反式切割活性：能有效切割体系中的ssDNA
• AapCas12b最佳剪切反应温度为60℃，比AacCas12b更耐高温，适用于与LAMP联用，开发恒温扩增/CRISPR-Cas检测体系。

• 顺势切割活性：效果媲美进口品牌T*

图1. AapCas12b Nuclease (10 μM) (Cat#14808ES)顺式切割活性验证

注：在20 μL的反应体系，含有带PMA序列的双链Target DNA、sgRNA、Cas12b和1×reaction buffer，在60°C下反应30 min，85°C下灭活5 min，在琼脂糖凝胶电泳测定结果显示，三批次AapCas12b Nuclease (10 μM) (Cat#14808ES)均能有效切割双链Target DNA,切割效果与进口品牌T*相当。

• 反式切割活性：能有效切割体系中的ssDNA

图2. AapCas12b Nuclease (10 μM) (Cat#14808ES)反式切割活性验证

注：在20 μL的反应体系，含有带PMA序列的双链Target DNA、sgRNA、Cas12b、Report ssDNA荧光探针和1×reaction buffer，在60℃反应1h，每30 sec采集一次荧光信号，结果显示在Target DNA、sgRNA、Cas12b共同存在的情况下，Report ssDNA荧光探针能被切割，从而释放荧光信号。

-25~-15℃保存，有效期2年。