——高效,快速,自连低
产 品 原 理
DNA 连接酶是一种能够催化相邻DNA 的3’-OH 和5’- 磷酸基末段形成磷酸二酯键,并且把两段DNA 拼接起来的核酸酶。T4 Ligase是目前应用比较多的病毒基因组编码的DNA 连接酶,主要从缺失型嗜菌体中提取,噬菌体T4 的30 基因是该酶的合成基因。T4 DNA连接酶在分子生物学中有广泛的应用。
产 品 简 介
在普通T4 DNA连接酶的基础上,利用定向改造技术,将T4 DNA ligase的有效催化活性结构域通过多轮突变筛选,得到一种连接活性更强的突变体。采用高纯度的生产标准和严格的质量检测,有效去除核酸酶、切口酶的残留,连接时间只需15min,打造一款快速高效的DNA连接酶。
产 品 应 用
产 品 特 点
◎ 应用更广泛:可催化粘性末端和平末端形成磷酸二脂键
◎ 连接更高效:建库自连率更低,表现为更好的文库多样性
◎ 适用于多种样本:包括FFPE、cfDNA等在内的所有样本均能高效连接
◎ 适用于多种类型片段连接:兼容illumina平台Y型接头以及MGI平台Bubble接头片段
◎ 严格质控:严格的批次性能与稳定性质控
连 接 效 率 自 评
将本产品用于NGS建库接头连接模块,样本为模式样本cfDNA模拟品,加入Y型建库接头,连接之后经Agilent 2100检测,理论上会出现三个峰:
◎ 双端均未连接接头片段;
◎ 仅一端连接接头片段;
◎ 双端均连接接头片段
而在二代测序文库构建中,只有双端都连接接头的片段才是合格可用的文库,因而通常可以通过双端均连接接头的片段占比反应接头连接效率。即双端连接接头片段占比越高,单端连接以及无接头连接的片段占比越低,连接效率越高。
*样本制备:使用170 bp多重PCR产物作为cfDNA模拟品,该PCR产物经过设计,3’端含有所有碱基的组合(共16种)。
极 低 的 自 连 率
建库试剂盒中搭配不同的连接酶筛选测试(其他组分一致),测序结果显示翌圣Novel DNA Ligase自连率更低。
样本 | 品牌 | Map Ratio% | Dup% | Clipped reads% | Diff chr Reads% |
降解严重 | Yeasen | 99.73 | 19.92 | 14.05 | 1.67 |
竞品 | 99.74 | 22.01 | 15.78 | 1.73 | |
降解程度地 | Yeasen | 99.83 | 14.95 | 5.29 | 0.63 |
竞品 | 99.79 | 14.81 | 6.16 | 1.64 |
产 品 信 息
名称 | 货号 | 规格 |
10298ES40/42 | 40/400 KU | |
10301ES40 | 40 KU |