Hifair®超逆转录酶Ultra Reverse Transcriptase(200 U/μL)(14604ES)
产品应用
Hifair® Ultra Reverse Transcriptase是对Hieff® M-MLV(H-) Reverse Transcriptase进行基因工程改造的全新逆转录酶,该酶缺乏RNaseH活性,合成全长cDNA的能力大幅提升,可扩增长达20kb的cDNA。Hifair® Ultra Reverse Transcriptase的热稳定性显著提高,耐受温度达65℃,可对具有复杂二级结构的RNA模板高效逆转录。与Hieff® M-MLV(H-) Reverse Transcriptase相比,Hifair® Ultra Reverse Transcriptase具有更高的持续合成能力及合成速率,同时增强了耐抑制剂的能力,可有效解决样品中的抑制剂导致逆转录效率低下的问题。
应用场景:
- 全长cDNA文库构建;
- 终点法PCR;
- RT-PCR及实时定量RT-PCR等。
- 超高灵敏度:可对1pg Total RNA有效逆转录;
- 快速逆转录:5 min即可完成cDNA合成;
- 持续合成能力强:无RNase H活性,最大合成长度可达20 kb;
- 高热稳定性:最高反应温度可达65℃,提升复杂结构模板兼容性;
- TdT活性:可向合成的DNA 3′ 末端非模板特异性地添加核苷酸。
- 无切口酶及核酸外切酶残留

图1. 切口酶及核酸外切酶残留检测
在20 μL反应体系中加入200 U 14604ES及0.5 μg 不同类型的底物DNA,37℃孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测DNA谱带不发生变化,表明14604ES无切口酶及核酸外切酶残留。
- 无RNase残留

图2. RNase残留检测
在20 μL反应体系中加入200 U 14604ES和0.5 μg底物RNA, 37℃孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测RNA谱带不发生变化,表明14604ES无RNase残留。
- 应用于RT-qPCR,具有优异的灵敏度及批次间稳定性。

图3. RT-qPCR检测数据,红,蓝,绿分别表示14604ES的3个不同批次
分别投入5、50、500 ng的293T RNA,使用3个批次的14604ES在55℃逆转录5 min,逆转录产物进行qPCR检测,结果显示14604ES的3个批次在各个投入量下,△Ct值均< 0.5,表明14604ES具有优异的灵敏度及批次间稳定性。
- 建库产量及宿主DNA残留优于进口品牌

图4. 14604ES应用于RNA-seq建库产量

图5.14604ES应用于 RNA-seq测序质量
应用于RNA建库,14604ES的建库产量高于进口品牌,测序数据质量相当且宿主DNA残留更低。
干冰运输,-20ºC保存,有效期一年。
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