产品简介

 

9°N DNA Ligase为高温连接酶，它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对，且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此可以用于检测单碱基替换。该酶以ATP作为辅因子，在45-70℃区间内均有活性。

 

产品信息

 

货号	14959ES84 / 14959ES92
规格	2,000 U / 10,000 U
酶活定义	1单位活性单位(U)定义为：在45℃条件下，孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段（12 bp粘性末端）发生连接所需要的酶量
酶储存液	10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 µg/ml BSA，50% Glycerol，10 mM (NH4)2SO4，pH 7.4 @ 25°C
浓度	40 U/µL

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	14959ES84	14959ES92
14959-A	9°N DNA Ligase (40 U/µL)	50 µL	250 µL
14959-B	10× 9°N DNA Ligase Buffer	200 µL	1 mL

 

产品应用

 

1. 通过连接酶检测反应（LDR）和连接酶链式（LCR）反应，检测等位基因特异性

2. 连接酶链式反应（LCR）中连接磷酸化寡核苷酸

3. 高温下连接 DNA 链上的切刻位点

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

 

1. 反应体系配制：

组分	用量
10× 9°N DNA Ligase Buffer	2 µL
底物：互补粘性末端>8 nt的DNA	100 ng-1 µg
9°N DNA Ligase (40 U/µL)	1-2 µL
ddH2O	To 20 µL

2. 反应条件：45-50℃连接15min。

3. 对于较长的双链DNA底物，琼脂糖电泳检测产物；对于短于100bp的短片段DNA，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测产物。

 

注意事项

 

1. 本产品可有效连接12 bp的互补片段，但无法连接4 bp的互补片段（典型限制酶消化产物）。

2. 本产品需要辅助因子ATP参与反应。

3. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅做科研用途！

 

 

Ver.CN20250106