E. coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5’-PO4末端与3’-OH末端形成磷酸二酯键，对平末端底物DNA几乎无明显连接活性。其反应的最适pH为7.5-8.0（Tris-HCl buffer），反应需NAD作为辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。另外，本款产品不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接反应。

该酶可以用于NGS甲基化建库中进行连接反应，另外也可以用于Okayama-Berg法克隆cDNA。

 

产品信息

货号	14955ES75/14955ES82/14955ES92
规格	300 U/1,200 U/12,000 U

 

组分信息

组分编号	组分名称	14955ES75	14955ES82	14955ES92
14955-A	E. coli DNA ligase (60 U/μL)	5 μL	20 μL	200 μL
14955-B	10×E. coli DNA ligase Buffer	30 μL	100 μL	1 mL
14955-C	10×BSA*(0.05%)	30 μL	100 μL	1 mL

* BSA应避免反复冻融，短期时间内使用可置于4℃

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

1.在无菌微量离心管中配制以下反应体系：

组分	体积
DNA	1 μg
10×E. coli DNA ligase Buffer	2 μL
E. coli DNA ligase (60 U/μL)	1 μL
10×BSA(0.05%)	2 μL
灭菌水	Up to 20 μL

2. 16℃温育1 h或过夜。

 

注意事项

1. Buffer在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20231017