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产品简介
IL-1又称为淋巴细胞刺激因子，细胞来源主要由活化的单核-巨噬细胞产生，主要存在形式为IL-1α和IL-1β，在体内发挥免疫调节作用。IL-1α作为IL-1家族主要成员，还可在上皮细胞、内皮细胞和基质细胞中表达，参与各种免疫反应、炎症过程和造血。可通过多种刺激在造血细胞和非造血细胞中上调。在非造血细胞中，IL-1α以TAK1依赖的方式通过髓系细胞上的IL1R发出信号，以诱导促炎细胞因子的表达。IL-1α也在病毒、真菌或原生动物感染后中性粒细胞的募集和宿主防御中发挥作用。IL-1α产生的失调与许多自身炎症性疾病相关，目前白介素1α的治疗潜力被科研人员关注，越来越多的临床试验将它们作为治疗药物和靶点。
翌圣Mouse IL-1α ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素1α(Mouse IL-1α)。特异性抗小鼠白介素1α抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的小鼠白介素1α与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素1α的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
98012ES48 / 98012ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
小鼠 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
6.64 pg/mL |
|
稀释线性 |
84 - 125% |
|
回收率 |
74 - 111% |
|
板内差 |
5.3% |
|
板间差 |
5.9% |
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
1000 |
2.719 |
2.785 |
2.752 |
2.752 |
|
500 |
1.794 |
1.769 |
1.782 |
1.783 |
|
250 |
1.097 |
1.017 |
1.057 |
1.054 |
|
125 |
0.611 |
0.570 |
0.590 |
0.592 |
|
62.5 |
0.342 |
0.309 |
0.325 |
0.328 |
|
31.25 |
0.197 |
0.180 |
0.189 |
0.188 |
|
15.63 |
0.125 |
0.113 |
0.119 |
0.115 |
|
0 |
0.040 |
0.039 |
0.040 |
/ |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
- 灵敏度检测
IL-1α的最低检测限为6.64 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。
|
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
457.5 |
107.3 |
28.3 |
463.6 |
105.7 |
29.4 |
|
标准差 |
28.1 |
4.5 |
1.5 |
32.1 |
4.0 |
2.0 |
|
变异系数（%） |
6.1 |
4.2 |
5.5 |
6.9 |
3.8 |
6.9 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-1α添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
94.6 |
78.0-110.9 |
|
血浆 |
80.9 |
73.7-89.8 |
|
细胞培养上清 |
95.8 |
78.5-104.8 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
98.6 |
91.0-105.7 |
|
1:04 |
107.2 |
110.3-105.9 |
|
1:08 |
117.5 |
114.5-121.6 |
|
1:16 |
103.7 |
98.4-107.4 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
94.5 |
83.8-103.3 |
|
1:04 |
109.3 |
98.0-120.1 |
|
1:08 |
112.2 |
111.5-112.8 |
|
1:16 |
110.5 |
103.3-124.8 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
102.7 |
92.2-114.2 |
|
1:04 |
111.4 |
103.5-115.8 |
|
1:08 |
107.5 |
104.6-109.1 |
|
1:16 |
101.7 |
98.2-106.6 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素1α。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
||
|
IFN-γ |
IL-6 |
IFN-γ |
IL-6 |
IFN-γ |
|
IL-1α |
IL-10 |
IL-1β |
IL-10 |
IL-1β |
|
IL-1β |
IL-12 |
IL-1ra |
IL-13 |
IL-2 |
|
IL-1ra |
IL-13 |
IL-2 |
IL-21 |
IL-4 |
|
IL-2 |
IL-16 |
IL-4 |
IL-22 |
IL-6 |
|
IL-4 |
IL-17 |
IL-5 |
|
IL-10 |
|
IL-5 |
IL-22 |
|
|
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
||
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
|
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
|
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
