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白细胞介素-10 (IL-10)，也称为细胞因子合成抑制因子(CSIF)，是IL-10α-螺旋细胞因子家族的创始成员。IL-10由许多活化的造血细胞类型以及肝星状细胞、角质形成细胞和胎盘细胞滋养层分泌。包含两个链内二硫键，并被表达为一种36 kDa非共价相关的同源二聚体。IL-10参与免疫调节包括抑制和刺激作用。
翌圣Rat IL-10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的大鼠白细胞介素10(Rat IL-10)。特异性抗大鼠白细胞介素10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的大鼠白细胞介素10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中大鼠白细胞介素10的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 主波长，630nm次波长测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
98501ES48 / 98501ES96 |
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规格 |
48 T / 96 T |
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检测范围 |
23.4-1500 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
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检测时长 |
2小时40分钟 |
|
灵敏度 |
0.871 pg/mL |
|
稀释线性 |
82.8 - 125.1% |
|
回收率 |
70.7 - 123.0% |
|
板内差 |
8.2% |
|
板间差 |
4.5% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
1500 |
2.601 |
2.706 |
2.654 |
2.613 |
|
750 |
1.594 |
1.486 |
1.540 |
1.500 |
|
375 |
0.859 |
0.772 |
0.816 |
0.775 |
|
187.5 |
0.514 |
0.412 |
0.463 |
0.423 |
|
93.8 |
0.266 |
0.218 |
0.242 |
0.202 |
|
46.9 |
0.161 |
0.124 |
0.142 |
0.102 |
|
23.4 |
0.104 |
0.084 |
0.094 |
0.054 |
|
0 |
0.040 |
0.040 |
0.040 |
/ |
- 灵敏度检测
大鼠IL-10的最低检测限为0.871 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
70.9 |
281.3 |
1078.2 |
61.3 |
295.9 |
1178.1 |
|
标准差 |
6.3 |
24.5 |
74.7 |
0.8 |
20.5 |
62.2 |
|
变异系数（%） |
8.8 |
8.7 |
6.9 |
1.3 |
6.9 |
5.3 |
- 回收率检测
通过不同水平的大鼠IL-10添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
91.0 |
81.9-109.6 |
|
血浆 |
74.6 |
70.7-79.5 |
|
细胞培养上清 |
105.2 |
82.3-123.0 |
- 稀释线性检测
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血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
99.4 |
93.3-103.3 |
|
1:04 |
103.6 |
82.8-113.6 |
|
1:08 |
112.3 |
97.6-118.3 |
|
1:16 |
112.7 |
110.6-116.8 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
115.0 |
108.9-118.6 |
|
1:04 |
117.6 |
112.7-124.0 |
|
1:08 |
121.1 |
117.4-125.1 |
|
1:16 |
121.9 |
118.5-123.6 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
102.9 |
97.9-109.0 |
|
1:04 |
102.1 |
99.0-105.3 |
|
1:08 |
105.8 |
103.0-110.0 |
|
1:16 |
95.8 |
95.2-96.2 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（ng/mL） |
样本值（ng/mL） |
|
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
EDTA血浆 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得23.4 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组大鼠IL-10，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
|
CINC-1 |
GM-CSF |
|
GDNF |
IFN-γ |
|
GM-CSF |
PDGF-CC |
|
IFN-γ |
TNF-α |
|
IL-1α |
|
|
IL-1β |
|
|
IL-2 |
|
检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver. CN20231121
