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产品简介
白细胞介素3(IL-3)是一种多效性因子，主要由活化的T细胞产生，可刺激多能干细胞以及各种谱系祖细胞的增殖和分化。此外，IL-3还影响成熟肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的功能活性。除了活化的T细胞外，其他细胞类型如人胸腺上皮细胞、活化的鼠肥大细胞、鼠角质形成细胞和神经元/星形胶质细胞也可以产生IL-3。在氨基酸序列水平上，成熟的人和鼠IL-3仅共享29%的序列同一性。与这种缺乏同源性一致的是，IL-3活性是高度物种特异性的，而人IL-3对小鼠细胞没有表现出活性。
翌圣Human IL-3 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人白介素3(Human IL-3)。特异性抗人白介素3抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白介素3与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素3的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97032ES48 / 97032ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
人 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
12.86 pg/mL |
|
稀释线性 |
79 - 101% |
|
回收率 |
80 - 110% |
|
板内差 |
3.3% |
|
板间差 |
4.8% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
1000 |
2.260 |
2.315 |
2.287 |
2.288 |
|
500 |
1.290 |
1.365 |
1.328 |
1.323 |
|
250 |
0.726 |
0.762 |
0.744 |
0.765 |
|
125 |
0.515 |
0.453 |
0.484 |
0.452 |
|
62.5 |
0.274 |
0.269 |
0.271 |
0.281 |
|
31.25 |
0.183 |
0.178 |
0.180 |
0.188 |
|
15.625 |
0.139 |
0.131 |
0.135 |
0.138 |
|
0 |
0.080 |
0.089 |
0.085 |
/ |
- 灵敏度检测
IL-3的最低检测限为12.86 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
531.26 |
126.78 |
31.26 |
525.29 |
127.49 |
31.26 |
|
标准差 |
17.75 |
2.62 |
1.37 |
31.54 |
5.28 |
1.37 |
|
变异系数（%） |
3.3 |
2.1 |
4.4 |
6.0 |
4.1 |
4.4 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-3添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
85.2 |
81.2-89.0 |
|
血浆 |
103.1 |
98.0-108.0 |
|
细胞培养上清 |
93.1 |
80.0-109.5 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
95.5 |
94.3-96.1 |
|
1:04 |
95.3 |
91.9-99.3 |
|
1:08 |
94.7 |
90.6-100.0 |
|
1:16 |
93.3 |
79.4-100.7 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
90.6 |
89.5-92.8 |
|
1:04 |
93.8 |
93.3-94.6 |
|
1:08 |
91.0 |
86.0-94.9 |
|
1:16 |
82.7 |
80.0-87.0 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
92.7 |
89.7-95.5 |
|
1:04 |
92.0 |
88.6-94.9 |
|
1:08 |
90.1 |
85.4-94.1 |
|
1:16 |
92.9 |
82.1-101.0 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
12 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
11.2 |
n.d.-89.2 |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人白介素3。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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IL-1α |
IL-7 |
IL-1α |
IL-6 |
|
IL-1β |
IL-8 |
IL-1β |
GM-CSF |
|
IL-2 |
IL-10 |
IL-2 |
IFN-γ |
|
IL-4 |
GM-CSF |
IL-3 |
|
|
IL-5 |
|
IL-4 |
|
|
IL-6 |
IFN-γ |
IL-5 |
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
