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人白介素8（Human IL-8），又称为趋化因子CXCL8，是巨噬细胞和上皮细胞等分泌的细胞因子。白介素-8结合趋化因子受体白介素-8受体α(IL8RA，又叫CXCR1)和白介素-8受体β(IL8RB，又叫CXCR2)而对中性粒细胞有细胞趋化作用而实现其对炎症反应的调节。 白介素-8还有很强的促血管生成作用。白介素-8在小支气管炎和囊性纤维化的发病中起重要作用。
它是一种属于趋化因子家族的细胞因子，近年来人们在研究中发现IL-8几乎参与哺乳动物的整个生殖过程如排卵、黄体形成、子宫内膜增殖、蜕膜化、胚胎着床及其生长发育等过程，许多临床研究表明，IL-8还与某些生殖病理过程有关，如子宫内膜异位症，不明原因的自然流产等。IL-8通过何种机制参与和调节人类生殖生理和病理过程备受国内外研究者们的关注，较为肯定的一种观点就是IL-8通过与其特异性的受体结合，引发一系列生物学事件，从而发挥作用。
翌圣Human IL-8 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、细胞培养上清中的人白介素8(Human IL-8)。特异性抗人白介素8抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白介素8与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素8的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97035ES48 / 97035ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
7.81-500 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
人 |
|
检测时长 |
5小时 |
|
灵敏度 |
0.382 pg/mL |
|
稀释线性 |
83.1 - 109.8 % |
|
回收率 |
73.7 - 112.4% |
|
板内差 |
8.4% |
|
板间差 |
7.0% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
500 |
2.799 |
2.618 |
2.708 |
2.690 |
|
250 |
1.917 |
1.983 |
1.950 |
1.931 |
|
125 |
1.370 |
1.233 |
1.302 |
1.283 |
|
62.5 |
0.811 |
0.757 |
0.784 |
0.766 |
|
31.25 |
0.442 |
0.436 |
0.439 |
0.421 |
|
15.625 |
0.252 |
0.234 |
0.243 |
0.225 |
|
7.81 |
0.134 |
0.131 |
0.133 |
0.114 |
|
0 |
0.021 |
0.016 |
0.019 |
/ |
- 灵敏度检测
人白介素8的最低检测限为0.382 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
30 |
30 |
30 |
|
|
平均值 |
14.0 |
73.6 |
251.6 |
13.5 |
71.0 |
249.4 |
|
标准差 |
1.25 |
5.49 |
22.26 |
0.87 |
5.01 |
18.69 |
|
变异系数（%） |
8.9 |
7.5 |
8.8 |
6.5 |
7.1 |
7.5 |
- 回收率检测
通过不同水平的人白介素8添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
90.0 |
73.7-111.6 |
|
细胞培养上清 |
90.9 |
81.6-112.4 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
90.1 |
83.5-99.7 |
|
1:04 |
88.3 |
87.0-89.0 |
|
1:08 |
91.6 |
83.7-98.2 |
|
1:16 |
89.2 |
83.1-95.2 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
99.5 |
90.6-106.6 |
|
1:04 |
99.1 |
90.7-109.8 |
|
1:08 |
98.1 |
92.2-106.1 |
|
1:16 |
99.9 |
95.1-108.5 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清样本 |
10 |
148.1 |
24.0-280.0 |
|
细胞上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内的7.81 pg/mL。
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人白介素8。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
Recombinant amphibian: |
Natural proteins: |
||
|
IL-1α |
IL-6 R |
TGF-α |
IL-1α |
TGF-β5 |
bovine FGF acidic |
|
IL-1β |
IL-7 |
TGF-β1 |
IL-3 |
|
bovine FGF basic |
|
IL-1ra |
IL-9 |
TGF-β3 |
IL-4 |
|
human PDGF |
|
IL-2 |
IL-10 |
TGF-β RII |
IL-5 |
|
porcine PDGF |
|
IL-3 |
IL-11 |
TNF-α |
IL-6 |
|
human TGF-β1 |
|
IL-4 R |
IL-12 |
TNF-β |
IL-9 |
|
porcine TGF-β1 |
|
IL-5 |
IL-13 |
TNF RI |
IL-10 |
|
porcine TGF-β2 |
|
IL-5 Rβ |
IP-10 |
TNF RII |
IL-13 |
|
|
|
IL-6 |
SCF |
VEGF |
TNF-α |
|
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver. CN20231116
