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产品简介
白细胞介素-7（IL-7）是一种25 kDa的造血家族细胞因子，在淋巴细胞分化、增殖和存活中发挥重要作用。人IL-7与小鼠、大鼠、犬和猫IL-7具有约60-63%的氨基酸序列同一性，人和小鼠IL-7表现出跨物种活性。IL-7由淋巴组织中的多种细胞产生，包括胸腺、骨髓和肠道的基质上皮细胞。IL-7及其受体IL-7R已用于各种免疫治疗应用，也常用于液体肿瘤和某些实体肿瘤模型，使用IL-7治疗的毒性或副作用较轻。
翌圣Human IL-7 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人白介素7(Human IL-7)。特异性抗人白介素7抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白介素7与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素7的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97069ES48 / 97069ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
7.81-500 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
人 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
4.42 pg/mL |
|
稀释线性 |
87 - 124% |
|
回收率 |
79 - 123% |
|
板内差 |
3.9% |
|
板间差 |
4.4% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
500 |
2.257 |
2.262 |
2.259 |
2.265 |
|
250 |
1.594 |
1.584 |
1.589 |
1.571 |
|
125 |
0.933 |
0.947 |
0.940 |
0.958 |
|
62.5 |
0.539 |
0.522 |
0.530 |
0.538 |
|
31.25 |
0.311 |
0.309 |
0.310 |
0.297 |
|
15.63 |
0.189 |
0.172 |
0.181 |
0.172 |
|
7.81 |
0.115 |
0.121 |
0.118 |
0.112 |
|
0 |
0.044 |
0.042 |
0.043 |
/ |
- 灵敏度检测
IL-7的最低检测限为4.42 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
234.10 |
55.81 |
13.64 |
230.25 |
55.96 |
13.49 |
|
标准差 |
8.22 |
1.86 |
0.65 |
9.10 |
2.18 |
0.70 |
|
变异系数（%） |
3.5 |
3.3 |
4.8 |
4.0 |
3.9 |
5.2 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-7添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
94.6 |
79.2-104.7 |
|
血浆 |
88.7 |
79.6-106.6 |
|
113.9 |
102.8-123.1 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
106.2 |
98.1-111.6 |
|
1:04 |
107.1 |
98.8-115.2 |
|
1:08 |
118.6 |
114.8-124.1 |
|
1:16 |
96.2 |
93.2-100.1 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
95.9 |
87.1-105.8 |
|
1:04 |
103.4 |
101.3-105.4 |
|
1:08 |
112.7 |
101.2-121.0 |
|
1:16 |
112.8 |
96.0-126.0 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
92.2 |
87.3-97.8 |
|
1:04 |
103.2 |
96.5-108.1 |
|
1:08 |
97.9 |
88.5-104.7 |
|
1:16 |
95.8 |
93.6-97.9 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
12 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得7.8 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人白介素7。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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|
IL-1α |
IL-7Ra |
IL-1α |
IL-10 |
|
IL-1β |
IL-8 |
IL-1β |
IL-12 |
|
IL-2 |
IL-9 |
IL-2 |
|
|
IL-3 |
IL-10 |
IL-3 |
|
|
IL-4 |
IL-11 |
IL-4 |
|
|
IL-5 |
IL-12 |
IL-6 |
|
|
IL-6 |
|
IL-7 |
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
||
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
