人白介素21 (Human IL-21)是一种I型细胞因子,调节T细胞、B细胞、NK细胞和髓细胞的功能。IL-21由活化的滤泡辅助性T细胞(Tfh)、Th17细胞和NKT细胞产生。Tfh衍生的IL-21通过其对Tfh细胞的自分泌作用和对免疫球蛋白成熟、浆细胞分化和记忆B细胞的旁分泌作用,在体液免疫的发展中发挥着重要作用。成熟人IL-21具133个氨基酸与小鼠和大鼠IL-21分别具有63%和61%序列同一性。IL-21与癌症免疫治疗、病毒感染和过敏等临床疾病有很大关系,也通过限制过敏原特异性IgE的产生和肥大细胞脱颗粒来抑制皮肤超敏反应。
翌圣Human IL-21 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的人白介素21(Human IL-21)。特异性抗人白介素21抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人白介素21与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素21的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 |
97030ES48 / 97030ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测物种 |
人 |
检测时长 |
4.5小时 |
灵敏度 |
8.16 pg/mL |
稀释线性 |
81 - 117% |
回收率 |
76 - 121% |
板内差 |
3.3% |
板间差 |
5.0% |
实验数据
IL-21的最低检测限为8.16 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
平均值 |
810.2 |
282.4 |
17.5 |
818.2 |
274.9 |
16.6 |
标准差 |
21.1 |
3.7 |
1.1 |
21.7 |
7.2 |
1.6 |
变异系数(%) |
2.6 |
1.3 |
6.1 |
2.7 |
2.6 |
9.8 |
通过不同水平的IL-21添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
104.0 |
94.5-119.4 |
血浆 |
85.5 |
76.8-91.8 |
细胞培养上清 |
105.0 |
82.8-121.8 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
104.7 |
104.2-105.0 |
1:04 |
101.3 |
100.1-101.9 |
1:08 |
112.5 |
108.0-117.8 |
1:16 |
113.6 |
112.3-114.9 |
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
99.3 |
97.1-101.3 |
1:04 |
93.9 |
93.0-95.3 |
1:08 |
92.3 |
90.6-93.1 |
1:16 |
87.0 |
81.3-91.6 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
109.6 |
108.4-111.8 |
1:04 |
107.8 |
107.3-108.1 |
1:08 |
105.9 |
100.2-110.5 |
1:16 |
96.9 |
93.3-100.0 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(pg/mL) |
样本值(pg/mL) |
血清 |
10 |
3.7 |
n.d.-36.9 |
血浆 |
10 |
2.2 |
n.d.-21.7 |
细胞培养上清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组人白介素21。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
|
IFN-γ |
IL-10 |
IFN-γ |
IFN-γ |
IL-1β |
IL-12 |
IL-1β |
IL-1β |
IL-2 |
IL-17 |
IL-2 |
IL-2 |
IL-4 |
IL-18 |
IL-4 |
IL-4 |
IL-5 |
IL-22 |
IL-6 |
IL-6 |
IL-6 |
MCP-1 |
IL-10 |
IL-10 |
IL-8 |
TNF-a |
TNF-a |
TNF-a |
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
||
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
|
CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |