Human IL-21 ELISA Kit 人白介素21 ELISA检测试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

人白介素21 (Human IL-21)是一种I型细胞因子,调节T细胞、B细胞、NK细胞和髓细胞的功能。IL-21由活化的滤泡辅助性T细胞(Tfh)、Th17细胞和NKT细胞产生。Tfh衍生的IL-21通过其对Tfh细胞的自分泌作用和对免疫球蛋白成熟、浆细胞分化和记忆B细胞的旁分泌作用,在体液免疫的发展中发挥着重要作用。成熟人IL-21具133个氨基酸与小鼠和大鼠IL-21分别具有63%和61%序列同一性。IL-21与癌症免疫治疗、病毒感染和过敏等临床疾病有很大关系,也通过限制过敏原特异性IgE的产生和肥大细胞脱颗粒来抑制皮肤超敏反应。

翌圣Human IL-21 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的人白介素21(Human IL-21)。特异性抗人白介素21抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人白介素21与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素21的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97030ES48 / 97030ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.63-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

检测时长

4.5小时

灵敏度

8.16 pg/mL

稀释线性

81 - 117%

回收率

76 - 121%

板内差

3.3%

板间差

5.0%

 

实验数据

  1. 标曲数据

  1. 灵敏度检测

IL-21的最低检测限为8.16 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

10

10

10

30

30

30

平均值

810.2

282.4

17.5

818.2

274.9

16.6

标准差

21.1

3.7

1.1

21.7

7.2

1.6

变异系数%

2.6

1.3

6.1

2.7

2.6

9.8

  1. 回收率检测

 通过不同水平的IL-21添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

104.0

94.5-119.4

血浆

85.5

76.8-91.8

细胞培养上清

105.0

82.8-121.8

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

104.7

104.2-105.0

1:04

101.3

100.1-101.9

1:08

112.5

108.0-117.8

1:16

113.6

112.3-114.9

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

99.3

97.1-101.3

1:04

93.9

93.0-95.3

1:08

92.3

90.6-93.1

1:16

87.0

81.3-91.6

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

109.6

108.4-111.8

1:04

107.8

107.3-108.1

1:08

105.9

100.2-110.5

1:16

96.9

93.3-100.0

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

10

3.7

n.d.-36.9

血浆

10

2.2

n.d.-21.7

细胞培养上清

6

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人白介素21。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

Recombinant Rat:

IFN-γ

IL-10

IFN-γ

IFN-γ

IL-1β

IL-12

IL-1β

IL-1β

IL-2

IL-17

IL-2

IL-2

IL-4

IL-18

IL-4

IL-4

IL-5

IL-22

IL-6

IL-6

IL-6

MCP-1

IL-10

IL-10

IL-8

TNF-a

TNF-a

TNF-a

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

400-6111-883