白细胞介素34(IL-34;也称为未表征的蛋白C16orf77)以由39kDa单体组成的同源二聚体形式分泌。它不属于已知的细胞因子家族。人IL-34合成为242个氨基酸(aa)的前体,其中包含20 aa信号序列和222 aa成熟链。成熟链包含一个潜在的N-连接糖基化位点。人IL-34在氨基酸水平上与小鼠IL-34相同71%。
IL-34在各种组织中表达,包括心脏、大脑、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、睾丸、卵巢、小肠、前列腺和结肠,在脾脏中含量最高。IL-34的受体是集落刺激因子1受体(CSF-1R)。IL-34刺激单核细胞增殖。在功能研究中,IL-34与CSF-1(CSF-1R的另一个配体)一样,刺激人单核细胞中细胞外信号调节激酶-1和-2(ERK1 / 2)的磷酸化。此外,IL-34促进了人骨髓培养物中巨噬细胞祖细胞集落形成单位巨噬细胞(CFU-M)的形成。
翌圣Human IL-34 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人白介素34(Human IL-34)。特异性抗人白介素34抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人白介素34与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体(生物素标记)孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素34的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 主波长,630nm次波长测定吸光度值。
产品信息
货号 |
97033ES48 / 97033ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
31.25-2000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测物种 |
人 |
检测时长 |
4小时55分钟 |
灵敏度 |
2.893 pg/mL |
稀释线性 |
73.7 -125.1 % |
回收率 |
73.4 - 126.8 % |
板内差 |
6.0 % |
板间差 |
3.2 % |
实验数据
人白介素34的最低检测限为2.893 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
平均值 |
1617.9 |
455.3 |
108.8 |
1696.5 |
473.9 |
109.4 |
标准差 |
64.3 |
25.5 |
9.1 |
68.3 |
20.6 |
1.3 |
变异系数(%) |
4.0 |
5.6 |
8.4 |
4.0 |
4.4 |
1.2 |
通过不同水平的人白介素34添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
95.3 |
73.4-118.9 |
血浆 |
101.3 |
84.7-126.8 |
细胞培养上清 |
106.0 |
82.3-122.6 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
100.1 |
93.6-103.2 |
1:04 |
105.5 |
94.8-114.5 |
1:08 |
108.2 |
101.9-121.6 |
1:16 |
105.7 |
94.1-121.9 |
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
95.6 |
89.2-103.4 |
1:04 |
95.8 |
79.1-125.1 |
1:08 |
97.6 |
83.1-123.3 |
1:16 |
94.1 |
79.2-121.5 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
88.0 |
82.0-93.5 |
1:04 |
87.1 |
81.7-90.2 |
1:08 |
88.4 |
73.7-107.7 |
1:16 |
90.0 |
81.4-94.9 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(pg/mL) |
样本值(pg/mL) |
血清 |
10 |
16 |
n.d.-61 |
EDTA血浆 |
4 |
n.d. |
n.d. |
肝素血浆 |
2 |
n.d. |
n.d. |
枸橼酸钠血浆 |
4 |
24.5 |
n.d.-68 |
细胞培养上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内的31.25 pg/mL。
本试剂盒识别天然和重组人白介素34。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
M-CSF |
IL-34 |
|
M-CSF |
|
M-CSF R |
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
||
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |