Human IL-34 ELISA Kit 人白细胞介素34 ELISA检测试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

白细胞介素34(IL-34;也称为未表征的蛋白C16orf77)以由39kDa单体组成的同源二聚体形式分泌。它不属于已知的细胞因子家族。人IL-34合成为242个氨基酸(aa)的前体,其中包含20 aa信号序列和222 aa成熟链。成熟链包含一个潜在的N-连接糖基化位点。人IL-34在氨基酸水平上与小鼠IL-34相同71%。

IL-34在各种组织中表达,包括心脏、大脑、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、睾丸、卵巢、小肠、前列腺和结肠,在脾脏中含量最高。IL-34的受体是集落刺激因子1受体(CSF-1R)。IL-34刺激单核细胞增殖。在功能研究中,IL-34与CSF-1(CSF-1R的另一个配体)一样,刺激人单核细胞中细胞外信号调节激酶-1和-2(ERK1 / 2)的磷酸化。此外,IL-34促进了人骨髓培养物中巨噬细胞祖细胞集落形成单位巨噬细胞(CFU-M)的形成。

翌圣Human  IL-34 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人白介素34(Human  IL-34)。特异性抗人白介素34抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人白介素34与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体(生物素标记)孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素34的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 主波长,630nm次波长测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97033ES48 / 97033ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

31.25-2000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

检测时长

4小时55分钟

灵敏度

2.893 pg/mL

稀释线性

73.7 -125.1 %

回收率

73.4 - 126.8 %

板内差

6.0 %

板间差

3.2 %

 

实验数据

  1. 标曲数据

  1. 灵敏度检测

人白介素34的最低检测限为2.893 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

36

36

36

平均值

1617.9

455.3

108.8

1696.5

473.9

109.4

标准差

64.3

25.5

9.1

68.3

20.6

1.3

变异系数%

4.0

5.6

8.4

4.0

4.4

1.2

  1. 回收率检测

  通过不同水平的人白介素34添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

95.3

73.4-118.9

血浆

101.3

84.7-126.8

细胞培养上清

106.0

82.3-122.6

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

100.1

93.6-103.2

1:04

105.5

94.8-114.5

1:08

108.2

101.9-121.6

1:16

105.7

94.1-121.9

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

95.6

89.2-103.4

1:04

95.8

79.1-125.1

1:08

97.6

83.1-123.3

1:16

94.1

79.2-121.5

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

88.0

82.0-93.5

1:04

87.1

81.7-90.2

1:08

88.4

73.7-107.7

1:16

90.0

81.4-94.9

 

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

10

16

n.d.-61

EDTA血浆

4

n.d.

n.d.

肝素血浆

2

n.d.

n.d.

枸橼酸钠血浆

4

24.5

n.d.-68

细胞培养上清

10

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内的31.25 pg/mL。

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人白介素34。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant mouse:

M-CSF

IL-34

 

M-CSF

 

M-CSF R

 

检测简图

 

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

400-6111-883