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产品简介
人白细胞介素-5 (Human IL-5)是由活化T细胞产生的细胞因子，可刺激嗜酸性粒细胞生长和分化。人IL-5由134个氨基酸残基组成，含22个氨基酸残基信号肽，2个糖基化点。人IL-5基因定位于第5号染色体，与IL-3、IL-4、GM-CSF等造血因子的基因密切连锁。人和鼠IL-5在氨基酸水平上有70%的同源性，生物学作用有交叉反应。
翌圣Human IL-5 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人白细胞介素-5(Human IL-5)。特异性抗人白细胞介素-5抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白细胞介素-5与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白细胞介素-5的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
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货号 |
97034ES48 / 97034ES96 |
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规格 |
48 T / 96 T |
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检测范围 |
3.5-225 pg/mL |
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检测方法 |
双抗夹心法 |
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检测物种 |
人 |
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检测时长 |
4小时40分钟 |
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灵敏度 |
0.16 pg/mL |
|
稀释线性 |
101.0 - 123.0% |
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回收率 |
70.3 - 107.4% |
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板内差 |
3.9% |
|
板间差 |
3.8% |
实验数据
1.标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
2.灵敏度检测
人白细胞介素-5的最低检测限为0.16 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
3.精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
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样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
118.4 |
31.8 |
8.0 |
117.3 |
31.4 |
7.8 |
|
标准差 |
4.65 |
0.86 |
0.39 |
4.13 |
0.90 |
0.40 |
|
变异系数（%） |
4.0 |
2.8 |
5.0 |
3.5 |
2.9 |
5.1 |
4.回收率检测
通过不同水平的人白细胞介素-5添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
97.9 |
87.5-107.2 |
|
血浆 |
83.7 |
70.3-94.8 |
|
细胞培养上清 |
97.4 |
84.6-107.4 |
5.稀释线性检测
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血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
104.9 |
103.1-108.7 |
|
1:04 |
109.8 |
106.8-114.0 |
|
1:08 |
107.8 |
102.6-111.2 |
|
1:16 |
105.3 |
103.6-108.5 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
105.6 |
101.6-107.7 |
|
1:04 |
113.5 |
108.0-120.7 |
|
1:08 |
112.7 |
106.5-118.6 |
|
1:16 |
114.0 |
105.0-123.0 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
107.8 |
106.4-110.4 |
|
1:04 |
108.2 |
101.0-114.2 |
|
1:08 |
108.9 |
105.9-114.0 |
|
1:16 |
108.0 |
102.6-113.8 |
6.样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
1.18 |
n.d.-7.60 |
|
血浆 |
10 |
7.05 |
n.d.-48.42 |
|
细胞培养上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得3.5 pg/mL
7.测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人血清白蛋白。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Natural proteins: |
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IL-3 |
mouse IL-5 |
equine IL-5 |
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IL-5 Rα |
rat IL-5 |
feline IL-5 |
|
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bovine IL-5 |
porcine IL-5 |
检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
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标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver. CN20231225
