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产品简介
白细胞介素-4（IL-4），也称为B细胞刺激因子-1，是一种多效性细胞因子，诱导初始辅助性T细胞分化为Th2细胞，由肥大细胞、活化的T细胞和骨髓基质细胞产生。成熟的人IL-4与牛、小鼠和大鼠IL-4分别具有55%、39%和43%的氨基酸序列同一性。IL-4在调节 T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、单核-巨噬细胞等多种细胞的增殖、分化、凋亡中发挥重要作用，也对肿瘤、类风湿关节炎、造血干细胞移植、过敏性疾病、疫苗免疫等疾病有多重生物学功能和治疗作用。
翌圣Human IL-4 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人白介素4(Human IL-4)。特异性抗人白介素4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白介素4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素4的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97066ES48 / 97066ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
31.25-2000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
人 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
5.57 pg/mL |
|
稀释线性 |
79 - 123% |
|
回收率 |
76 - 116% |
|
板内差 |
3.3% |
|
板间差 |
8.4% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
2000 |
2.840 |
2.700 |
2.770 |
2.790 |
|
1000 |
2.478 |
2.426 |
2.452 |
2.424 |
|
500 |
1.903 |
1.835 |
1.869 |
1.860 |
|
250 |
1.143 |
1.233 |
1.188 |
1.217 |
|
125 |
0.677 |
0.680 |
0.678 |
0.694 |
|
62.5 |
0.409 |
0.415 |
0.412 |
0.373 |
|
31.25 |
0.216 |
0.234 |
0.225 |
0.208 |
|
0 |
0.044 |
0.044 |
0.044 |
/ |
- 灵敏度检测
IL-4的最低检测限为5.57 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
1061.34 |
282.31 |
61.95 |
1139.72 |
291.45 |
64.65 |
|
标准差 |
54.70 |
7.39 |
1.25 |
108.02 |
26.82 |
4.20 |
|
变异系数（%） |
5.2 |
2.6 |
2.0 |
9.5 |
9.2 |
6.5 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-4添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
90.7 |
79.3-101.4 |
|
血浆 |
93.5 |
90.3-101.0 |
|
细胞培养上清 |
97.1 |
75.8-116.4 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
94.0 |
87.7-104.5 |
|
1:04 |
93.0 |
83.3-108.3 |
|
1:08 |
97.1 |
86.5-113.5 |
|
1:16 |
106.4 |
94.6-123.6 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
85.6 |
83.6-88.9 |
|
1:04 |
91.5 |
83.6-98.2 |
|
1:08 |
91.8 |
87.1-96.2 |
|
1:16 |
92.9 |
79.2-101.7 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
105.6 |
94.8-111.6 |
|
1:04 |
110.1 |
107.0-113.7 |
|
1:08 |
109.0 |
100.4-116.0 |
|
1:16 |
106.1 |
99.1-109.9 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
12 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人白介素4。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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IL-1α |
IL-7 |
IL-1α |
IL-6 |
|
IL-1β |
IL-8 |
IL-1β |
GM-CSF |
|
IL-2 |
IL-10 |
IL-2 |
IFN-γ |
|
IL-3 |
GM-CSF |
IL-3 |
|
|
IL-5 |
|
IL-4 |
|
|
IL-6 |
IFN-γ |
IL-5 |
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
|
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
