白细胞介素 10 (IL-10),也称为细胞因子合成抑制因子(CSIF),能够抑制Th1细胞的激活和相关细胞因子(如IL-1β和 TNF-α)的产生。IL-10是一种178个氨基酸的分子,含有两个链内二硫键桥,并以36kDa的非共价相关同源二聚体的形式表达。人与牛、犬、马、猫、小鼠、绵羊、猪和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各种白细胞,减弱过度的免疫反应。它影响单核细胞/巨噬细胞的三个重要功能:抗原呈递、免疫介质的释放和吞噬作用,这也代表它抑制了单核细胞/巨噬细胞的所有功能。与IL-4、IL-5类似,IL-10也参与了自身免疫病的发展。如炎症性肠病(IBD)中可以观察到IL-10 的存在;在慢性肝部炎症中,IL-10起到了保护作用。
翌圣Mouse IL-10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素10(Mouse IL-10)。特异性抗小鼠白介素10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠白介素10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素10的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 |
98025ES48 / 98025ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
62.5-4000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测物种 |
小鼠 |
检测时长 |
4.5小时 |
灵敏度 |
27.53 pg/mL |
稀释线性 |
78 - 106% |
回收率 |
78 - 118% |
板内差 |
3.9% |
板间差 |
4.8% |
实验数据
数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。
IL-10的最低检测限为27.53 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
平均值 |
1865.20 |
446.00 |
120.01 |
1898.69 |
454.42 |
119.04 |
标准差 |
64.23 |
18.27 |
5.01 |
98.59 |
21.39 |
5.32 |
变异系数(%) |
3.4 |
4.1 |
4.2 |
5.2 |
4.7 |
4.5 |
通过不同水平的IL-10添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
85.6 |
77.5-95.8 |
细胞培养上清 |
110.7 |
106.0-117.9 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
83.2 |
79.6-88.1 |
1:04 |
94.1 |
90.6-97.3 |
1:08 |
99.1 |
89.5-104.9 |
1:16 |
91.8 |
88.7-95.7 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
85.5 |
77.7-97.0 |
1:04 |
90.6 |
83.4-95.5 |
1:08 |
99.4 |
95.5-102.5 |
1:16 |
96.2 |
89.8-105.8 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(pg/mL) |
样本值(pg/mL) |
血清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
血浆 |
4 |
n.d. |
n.d. |
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得62.5 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素10。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
|
IL- 1β |
IL-12 |
IL-1β |
IL-1β |
IL-2 |
IL-17A |
IL-2 |
IL-2 |
IL-4 |
IL-21 |
IL-4 |
IL-4 |
IL-5 |
IL-22 |
IL-6 |
IL-6 |
IL-6 |
IL-23 |
IL- 17A |
IL- 17A |
IL-8 |
TNF-α |
TNF-α |
TNF-α |
IL-10 |
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |