Mouse IL-10 ELISA Kit

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

白细胞介素 10 IL-10),也称为细胞因子合成抑制因子(CSIF),能够抑制Th1细胞的激活和相关细胞因子(如IL-1β和 TNF-α)的产生。IL-10是一种178个氨基酸的分子,含有两个链内二硫键桥,并以36kDa的非共价相关同源二聚体的形式表达。人与牛、犬、马、猫、小鼠、绵羊、猪和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各种白细胞,减弱过度的免疫反应。它影响单核细胞/巨噬细胞的三个重要功能:抗原呈递、免疫介质的释放和吞噬作用,这也代表它抑制了单核细胞/巨噬细胞的所有功能。与IL-4、IL-5类似,IL-10也参与了自身免疫病的发展。如炎症性肠病(IBD)中可以观察到IL-10 的存在;在慢性肝部炎症中,IL-10起到了保护作用。

翌圣Mouse IL-10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素10(Mouse IL-10)。特异性抗小鼠白介素10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠白介素10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素10的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

98025ES48 / 98025ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

62.5-4000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

小鼠

检测时长

4.5小时

灵敏度

27.53 pg/mL

稀释线性

78 - 106%

回收率

78 - 118%

板内差

3.9%

板间差

4.8%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析

  1. 灵敏度检测

IL-10的最低检测限为27.53 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

8

8

8

24

24

24

平均值

1865.20

446.00

120.01

1898.69

454.42

119.04

标准差

64.23

18.27

5.01

98.59

21.39

5.32

变异系数%

3.4

4.1

4.2

5.2

4.7

4.5

  1. 回收率检测

 通过不同水平的IL-10添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

85.6

77.5-95.8

细胞培养上清

110.7

106.0-117.9

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

83.2

79.6-88.1

1:04

94.1

90.6-97.3

1:08

99.1

89.5-104.9

1:16

91.8

88.7-95.7

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

85.5

77.7-97.0

1:04

90.6

83.4-95.5

1:08

99.4

95.5-102.5

1:16

96.2

89.8-105.8

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

4

n.d.

n.d.

血浆

4

n.d.

n.d.

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得62.5 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素10。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

Recombinant Rat:

IL- 1β

IL-12

IL-1β

IL-1β

IL-2

IL-17A

IL-2

IL-2

IL-4

IL-21

IL-4

IL-4

IL-5

IL-22

IL-6

IL-6

IL-6

IL-23

IL- 17A

IL- 17A

IL-8

TNF-α

TNF-α

TNF-α

IL-10

 

 

 

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883