dsDNase (with RNase Inhibitor)是一种核酸内切酶，能够裂解DNA中的磷酸二酯键，生成带有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。dsDNase能够特异性的消化双链DNA而不会消化单链DNA、引物、探针和RNA。dsDNase具有热敏感性，可在65℃条件下快速失活。该产品主要用于反转录实验前快速去除RNA样本中的基因组DNA污染，与传统的使用DNase I去除基因组DNA污染的方法相比，无需额外加入EDTA失活，同时节省实验时间，保证RNA定量的准确性。

 

产品信息

货号	14533ES50 / 14533ES80
规格	50 T / 1,000 T
活性定义	根据Kunitz实验方法，在25℃ pH5.0的条件下，以过量的大分子DNA为底物，在260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加0.001的酶量定义为1个活性单位（U）

 

组分信息

组分编号	产品名称	14533ES50	14533ES80
14533-A	dsDNase (with RNase Inhibitor)	50 μL	1 mL
14533-B	10×dsDNase Buffer	200 μL	4 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

1.于冰上配制如下反应体系

组分	用量
dsDNase (with RNase Inhibitor)	1 μL
10×dsDNase Buffer	1 μL
模板 RNA	X μL
总 RNA	1 pg~5 μg/10 μL
mRNA	0.1 pg~500 ng/10 μL
特异性 RNA	0.01 ng~500 ng/10 μL
Nuclease-Free Water	up to 10 μL

2.轻轻吹打混匀反应体系后，将以上混合液在 37℃温育 2~5 min；

3.65℃热失活 10 min，迅速将获得的RNA置于冰上，用于后续实验。

 

注意事项

1. 抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制dsDNase的活性。

2. 若RNA样本下游用于RT-PCR，且目的基因长度≥3 kb，失活步骤前需添加终浓度为10 mM的DTT。

3. 热灭活条件：1）65℃ 10 min；2）85℃ 5 min。

3. 该反应体系无需再另外加入RNase Inhibitor。

4. 本产品仅作科研用途。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230411