脱氧核糖核酸酶I(DNase I),即Deoxyribonuclease I,一种发现于多种细胞和组织的核酸酶,属核酸内切酶,靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。最佳的工作范围是pH7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺,分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以粉末形式供应,酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。
CAS号(CAS NO.) | 9003-98-9 |
分子量(Molecular Weight) | ~31 kDa |
孔尼茨单位(Kunitz Units) | ≥2000Kunitz Units/mg protein |
类型(Type) | Type IV |
最佳PH(Optimal pH) | 7~8 |
外观(Appearance) | 白色至浅黄色粉末 |
纯度(Purity) | Protein: ≥80% by Biuret |
激活剂(Activators) | 多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
抑制剂(Inhibitors) | β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白 |
活力单位定义(Unit Definition) | 25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。 |
冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存,有效期2年。
Q:10607ES 和 10608ES 的区别?
A:10607 以含氯化钙的冻干粉形式供应;10608 以粉末形式供应。两者用途一样,用于清除蛋白中的 DNA。
Q: 我想问一下这个Kunitz跟u如何换算呢?那如果说反应体系中需要加入150U,那我该怎么换算呀?
A: Kunitz Units和U是不同的单位,不能直接换算,它的酶活就是Kunitz Units不是U,是孔尼茨单位,不能换算的。
如果是要要加入150U是没法计算的,但如果是要150 Kunitz Units,可以根据每个批次的COA上的测试的酶活情况计算。比如,某批次酶活是2500Kunitz Units/mg,那就是加入150/2500=0.06mg。
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