Hifair^® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR是Hifair^® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR的升级版，在满足了可在同一管中进行反转录和基因组去除两个反应的同时，既简化了反应过程、大幅缩短了反应时间，又提高了反转录产物的产量。本产品4×Hifair^® AdvanceFast One-Step RT SuperMix中含反转录反应所需的全部试剂，反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA，同时去除基因组DNA污染。本产品适合具有复杂的RNA模板的反转录，也非常适合少量模板以及低拷贝基因的反转录。

本产品反转录产物兼容探针法与染料法qPCR，探针法与染料法qPCR Mix分别推荐翌圣Hieff Unicon^® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON^® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184)，进行高性能基因表达分析。本产品反转录产物不适用于后续基因克隆等长片段扩增，如果需要，推荐翌圣Hifair^® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149、Cat#11150)进行高效反转录。

 

组分信息

组分编号	组分名称	11151ES10	11151ES60
11151-A	4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix	50 μL	500 μL
11151-B	gDNA Remover Mix	10 μL	100 μL
11151-C	RNase-free Water	1 mL	2×1 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

1. 在冰上融化11151-A/B/C组分，将试剂各组分充分震荡混匀，并在RNase-free离心管中配置如下体系：

组分	体积 （μL）
RNase-free Water	To 20 μL
4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix	5 μL
gDNA Remover Mix	1 μL
Total RNA	10 pg -5 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng*

表1 反应体系

*建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反应程序

温度	时间
37℃	5 min*
85℃	30 s

表2 反应程序

*该过程包含反转录及gDNA消化。

3. 反转录产物可立即用于qPCR反应，也可-20°C短期保存，长期保存建议分装后于-80°C存放，避免反复冻融。

 

注意事项

1.所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免RNase污染。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20230530