RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.)，经E.coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割，但对单链RNA切割活性极低，对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性，但是室温下活性极低。本品极度耐热，95°C孵育45 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。

应用场景：

• LAMP高灵敏度探针法检测；
• RNaseHII依赖性PCR(rhPCR)；
• 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸；
• 冈崎片段RNA部分的降解。

• 在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性；
• RNase HII极度耐热，95°C反应30 min后，仍保持活性，可于rhPCR各反应体系兼容，也适用于LAMP等；
• 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留，低宿主残留（＜0.5 copies/U）;
• 本品为14539ES的无甘油版本，适用于冻干体系。

• E. coli基因组DNA残留< 0.5 copies/100 U

对不同批次的RNase HII (Cat#14539ES)进行E. coli基因组DNA残留检测，结果显示翌圣RNase HII宿主基因组DNA残留远低于0.5 copies/100 U。

图1. E. coli基因组DNA残留检测

• 95℃耐热性测试

对RNase HII (Cat#14539ES)进行95℃加热0~45 min后，测试RNase HII的酶活结果，结果表明翌圣RNase HII加热45 min后，酶活几乎没有损失。

图2. 95℃耐热测试结果

• 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留

将1 U 不同批次的RNase HII分别与相应的底物DNA/RNA在37℃孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，RNase HII无核酸外切酶、切口酶、RNase残留。

图3. 核酸外切酶、切口酶、RNase残留检测结果

2～8℃保存，有效期6个月。