Uracil-Specific Excision Reagent是尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG) 和DNA糖基化酶-裂解酶 (Endo VIII) 的混合酶，能在尿嘧啶位置产生单个核苷酸的缺口。UDG催化尿嘧啶碱基的切割，形成一个AP位点（脱碱基嘧啶位点），但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo VIII的裂解酶活力使脱碱基位点3′和5′端的磷酸二酯键断裂，释放无碱基的脱氧核糖。

应用场景：

• RNA链特异性文库构建；
• 尿嘧啶特异性删除介导的克隆；
• TALE基本单位的组装；
• 单细胞多个cDNA串联建库。

• Endo VIII（Cat#14536ES）与UDG（Cat#14455ES）的混合酶；
• 该酶混合物能在DNA的dU位置产生一个单核苷酸缺口，适用于ssDNA、dsDNA及环状DNA；
• 无核酸酶、RNase残留，低宿主残留。

• dUTP切除效果与进口品牌N*一致

分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent（1 U/μL）与进口品牌N*的同类产品（1 U/μL）切除10 pmol含dUTP的双链DNA，琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的切除效果一致。

图1. dUTP切除效果对比图

• 性能优于进口品牌N*

分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent（1 U/μL）和进口品牌N*的同类产品（1 U/μL）连接600 bp DNA片段构建载体，并导入到大肠杆菌中培养，观察培养皿上的菌落数，结果表明，翌圣Uracil-Specific Excision Reagent应用于尿嘧啶特异性删除介导的克隆效果优于进口品牌N*。

图2. 菌落数对比

• 客户反馈-RNA链特异性建库性能与进口品牌N*一致

客户测试翌圣14537ES与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能，扩增曲线表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能一致。

图3. qPCR扩增曲线

• 客户反馈-超低的批间差异和高剪切效率

客户测试翌圣3个批次的Uracil-Specific Excision Reagent的剪切效率，柱状图表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent超低的批间差异和高剪切效率。

图4. 不同批次间的剪切效率

-15~-25℃保存，有效期1年。

Q：请问14537ES切完样本之后5'和3'带有的基团是什么？

A：产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。作用机制是UDG 先切除 dU 碱基，形成一个 AP 位点（脱碱基位点），但此时磷酸二酯骨架仍保持完整，Endonuclease VIII 随即在 AP 位点通过 β,δ-消除反应 切断该位点 3' 端和 5' 端 的磷酸二酯键，将无碱基的脱氧核糖彻底释放，留下一个 1 nt 的缺口。