Uracil-Specific Excision Reagent 尿嘧啶特异性切除试剂(1 U/μL)
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Uracil-Specific Excision Reagent是尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG) 和DNA糖基化酶-裂解酶 (Endo VIII) 的混合酶,能在尿嘧啶位置产生单个核苷酸的缺口。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个AP位点(脱碱基嘧啶位点),但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo VIII的裂解酶活力使脱碱基位点3′和5′端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。

应用场景:

  • RNA链特异性文库构建;
  • 尿嘧啶特异性删除介导的克隆;
  • TALE基本单位的组装;
  • 单细胞多个cDNA串联建库。
产品特色
  • Endo VIII(Cat#14536ES)与UDG(Cat#14455ES)的混合酶;
  • 该酶混合物能在DNA的dU位置产生一个单核苷酸缺口,适用于ssDNA、dsDNA及环状DNA;
  • 无核酸酶、RNase残留,低宿主残留。
应用案例
  • dUTP切除效果与进口品牌N*一致

分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent(1 U/μL)与进口品牌N*的同类产品(1 U/μL)切除10 pmol含dUTP的双链DNA,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的切除效果一致。

图1. dUTP切除效果对比图

  • 性能优于进口品牌N*

分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent(1 U/μL)和进口品牌N*的同类产品(1 U/μL)连接600 bp DNA片段构建载体,并导入到大肠杆菌中培养,观察培养皿上的菌落数,结果表明,翌圣Uracil-Specific Excision Reagent应用于尿嘧啶特异性删除介导的克隆效果优于进口品牌N*。

图2. 菌落数对比

  • 客户反馈-RNA链特异性建库性能与进口品牌N*一致

客户测试翌圣14537ES与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能,扩增曲线表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能一致。

图3. qPCR扩增曲线

  • 客户反馈-超低的批间差异和高剪切效率

客户测试翌圣3个批次的Uracil-Specific Excision Reagent的剪切效率,柱状图表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent超低的批间差异和高剪切效率。

图4. 不同批次间的剪切效率

存储条件

-15~-25℃保存,有效期1年。

FAQ

Q:请问14537ES切完样本之后5'和3'带有的基团是什么?

A:产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。作用机制是UDG 先切除 dU 碱基,形成一个 AP 位点(脱碱基位点),但此时磷酸二酯骨架仍保持完整,Endonuclease VIII 随即在 AP 位点通过 β,δ-消除反应 切断该位点 3' 端和 5' 端 的磷酸二酯键,将无碱基的脱氧核糖彻底释放,留下一个 1 nt 的缺口。

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