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T4 Endonuclease V(T4核酸内切酶V),也被称为T4 PDG(嘧啶二聚体糖基酶),是一种具有双重活性的DNA 糖基化酶,结合了DNA N-糖基化酶和 AP 裂解酶活性的活性。该酶可识别并结合在因紫外线照射引起的cis-syn 型环丁烷嘧啶二聚体),接着在嘧啶二聚体的5’端切割糖苷键,从而释放出二聚体并留下一个AP位点,随后利用其内切酶活性切割AP位点上的磷酸二酯键,在DNA链上形成一个单核苷酸的间隙。
- 蛋白纯度≥95%(SDS-PAGE法);
- 不含非特异性DNA酶残留;
- 大肠杆菌宿主gDNA残留<0.05 copies/1U。
- 不含非特异性DNase残留
20 μL反应体系中,加入3个批次的3 U T4 Endonuclease V和 0.5 μg λDNA-HindⅢ digest,37℃孵育16 h,琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化,表明翌圣Endonuclease IV不含非特异性DNase残留。

图1. 非特异性DNase残留检测
- 宿主(E.coli) gDNA残留<0.05 copies/1U
对3个批次的翌圣T4 Endonuclease V进行宿主(E.coli)基因组DNA残留检测,结果显示翌圣Endonuclease IV的宿主gDNA残留<0.05 copies/1 U。

图2. 宿主gDNA残留
-25~-15℃保存,有效期1年。
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