产品简介

 

Thermolabile dsDNase（热敏双链DNA特异性核酸酶）是一种能选择性降解双链DNA，但对单链核酸分子几乎没有作用的核酸内切酶，该酶能够裂解双链DNA中的磷酸二酯键，生成带有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。此外，Thermolabile dsDNase具有热敏感性，可在65℃条件下快速失活。该产品主要用于反转录实验前快速去除RNA样本中的基因组DNA污染，与传统的使用DNase I去除基因组DNA污染的方法相比，无需额外加入EDTA失活，同时节省实验时间，保证RNA定量的准确性。

 

产品应用

 

RNA提取中DNA的去除；反转录实验前gDNA的去除；mNGS检测中去除宿主DNA；去除分子诊断原料中的背景gDNA污染

 

产品优势

 

●高效：只需37℃ 5 min即可消化1 μg基因组DNA；

●蛋白纯度高：蛋白纯度≥99%；

●无RNase酶残留：对样品中RNA无影响；

●热敏感：65℃加热10 min即可快速失活，无需纯化，gDNA去除与逆转录反应可在同管内完成。

 

产品性能

 

●纯度高：蛋白纯度≥99%

图1：SDS-PAGE法检测14544ES蛋白纯度结果

 

●无RNase酶残留：对样品中RNA无影响

图2：20 μL反应体系中加入20 U来自进口厂家A、进口厂家B和翌圣3批次Thermolabile dsDNase，同时分别加入0.5 μg 293T RNA，37℃孵育4小时。琼脂糖凝胶电泳结果显示，翌圣3批次Thermolabile dsDNase组RNA谱带与阴性对照一致，进口厂家A和进口厂家B组RNA条带有轻微降解，说明翌圣3批次Thermolabile dsDNase中无RNase残留，对样本中RNA无影响。

 

●热敏感：65℃加热10 min即可快速失活

图3：Thermolabile dsDNase热敏感性验证结果图。阴性对照组：未加dsDNase酶；阳性对照组：反应体系中加入0.2 U来自进口厂家A、进口厂家B和翌圣3批次Thermolabile dsDNase；热处理组：反应体系中加入20 U来自进口厂家A、进口厂家B和翌圣3批次经过65℃加热10 min处理的Thermolabile dsDNase酶。然后，分别在体系中加入1 μg小牛胸腺DNA，37℃孵育5 min。琼脂糖凝胶电泳结果显示，0.2 U Thermolabile dsDNase可消化1 μg小牛胸腺DNA，Thermolabile dsDNase经过65℃孵育10 min可完全失活。

 

组分信息

 

组分编号	产品名称	14544ES80	14544ES94
14544-A	Thermolabile dsDNase (20 U/μL)	50 μL	1 mL
14544-B	10×dsDNase Buffer	200 μL	2×1 mL

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

注意事项

 

1. 抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β-巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制dsDNase的活性。

2. 本产品仅作科研用途。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20241205