Human GDF-15 ELISA Kit

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

人生长分化因子-15(GDF-15)又称巨噬细胞抑制性细胞因子-1(Mic-1),是转化生长因子β (TGF-β) 超家族的趋异成员。GDF-15的前体蛋白由308个氨基酸残基组成,经过酶切修饰后形成一个含有7个半胱氨酸残基的C端结构域。在人体中,GDF-15在胎盘中高表达,肾脏、胰腺和前列腺中表达水平较低。白细胞介素-1和转化生长因子-β等细胞因子可迅速诱导其表达。GDF-15具有多种生物学功能。GDF-15在肿瘤的发生和转移中也起着重要的作用,如结直肠癌、乳腺癌和前列腺癌,GDF-15的表达均有显著增加。在肿瘤进展期间,GDF-15在细胞凋亡、分化、血管生成和转移均有影响,并在成癌症期间体重减轻方面有所影响。

翌圣Human GDF-15 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的人生长分化因子15(Human GDF-15)。特异性抗人生长分化因子15抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人生长分化因子15与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人生长分化因子15的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97021ES48 / 97021ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

7.81-500 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

检测时长

5小时

灵敏度

0.205 pg/mL

稀释线性

85.7 - 105.0 %

回收率

80.9 - 98.9%

板内差

4.3%

板间差

4.4%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析
标准曲线

  1. 灵敏度检测

人生长分化因子15的最低检测限为0.205 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

36

36

36

平均值

15.0

59.4

243.0

14.7

59.7

246.2

标准差

0.72

1.86

12.18

0.80

2.01

10.84

变异系数%

4.8

3.1

5.0

5.4

3.4

4.4

  1. 回收率检测

  通过不同水平的人生长分化因子15添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清样本

92.1

80.9-98.9

血浆样本

91.4

81.5-98.6

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

101.5

99.8-103.8

1:04

101.4

99.9-102.4

1:08

93.3

90.3-95.3

1:16

88.7

87.2-90.6

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

100.2

96.5-105.0

1:04

97.0

94.0-100.0

1:08

91.1

86.7-95.5

1:16

88.4

85.7-90.5

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清样本

10

959.5

260-3114.6

肝素血浆

10

470.7

145.1-1275.8

EDTA血浆

10

1550.7

197.8-6836.5

枸橼酸钠血浆

10

1948.5

247.7-9605.4

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人生长分化因子15。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant mouse:

GDF-5

GDF-5

GDF-7

GDF-6

GDF-9

GDF-7

GDF-11

GDF-8

TGF-β RII/Fc

 

TFG-β2

 

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883