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产品简介
Galectin-1，半乳糖凝集素家族成员之一。半乳糖凝集素在细胞内和分泌后的许多系统中发挥作用，含有一个或两个碳水化合物识别结构域（CRR），其介导对含N-乙酰氨基半乳糖的糖蛋白的识别。Galectin-1可正向或负向调节细胞生长和增殖，通过诱导Th2型细胞因子和抑制促炎细胞因子的产生来调节细胞因子的分泌。Galectin-1还可以调节细胞-细胞以及细胞-基质的相互作用，促进细胞附着或分离。此外，Galectin-1在免疫抑制和抗炎特性中也发挥重要作用。
翌圣Human Galectin-1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的Galectin-1。特异性抗Galectin-1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的Galectin-1与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中Galectin-1的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97020ES48 / 97020ES96 |
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规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
0.31-20 ng/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
0.08 ng/mL |
|
稀释线性 |
76 - 120% |
|
回收率 |
84 - 123% |
|
板内差 |
5.7% |
|
板间差 |
8.1% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（ng/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
20 |
2.726 |
2.682 |
2.704 |
2.709 |
|
10 |
2.082 |
1.916 |
1.999 |
1.981 |
|
5 |
1.327 |
1.202 |
1.264 |
1.291 |
|
2.5 |
0.824 |
0.742 |
0.783 |
0.766 |
|
1.25 |
0.438 |
0.404 |
0.421 |
0.427 |
|
0.63 |
0.240 |
0.243 |
0.241 |
0.234 |
|
0.31 |
0.123 |
0.125 |
0.124 |
0.127 |
|
0 |
0.015 |
0.016 |
0.016 |
/ |
- 灵敏度检测
Galectin-1的最低检测限为0.08 ng/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
9.00 |
2.22 |
0.64 |
9.03 |
2.29 |
0.65 |
|
标准差 |
0.58 |
0.11 |
0.04 |
0.90 |
0.16 |
0.05 |
|
变异系数（%） |
6.48 |
4.92 |
5.66 |
10.00 |
6.91 |
7.50 |
- 回收率检测
通过不同水平的Galectin-1添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
101.3 |
89.4-123.2 |
|
血浆 |
101.0 |
84.0-118.9 |
|
细胞培养上清 |
100.6 |
95.2-110.8 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
94.0 |
84.1-107.8 |
|
1:04 |
107.2 |
98.2-115.9 |
|
1:08 |
104.4 |
98.1-115.9 |
|
1:16 |
109.1 |
98.9-119.9 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
92.2 |
76.4-100.6 |
|
1:04 |
99.2 |
98.0-99.8 |
|
1:08 |
101.3 |
100.5-101.9 |
|
1:16 |
107.7 |
92.2-118.1 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
84.7 |
78.9-88.8 |
|
1:04 |
95.5 |
88.6-102.3 |
|
1:08 |
99.5 |
98.5-100.6 |
|
1:16 |
100.2 |
94.1-106.9 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（ng/mL） |
样本值（ng/mL） |
|
血清 |
8 |
0.36 |
n.d-2.08 |
|
血浆 |
6 |
0.51 |
n.d-1.28 |
|
细胞培养上清 |
4 |
0.35 |
n.d-0.7 |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得0.31 ng/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组Galectin-1，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
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Galectin-2 |
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Galectin-3 |
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Galectin-4 |
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Galectin-7 |
|
Galectin-8 |
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Fibronectin |
检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
