血小板衍生生长因子(PDGF)是由二硫键连接二聚体蛋白组成,其家族共有四种同二聚体蛋白质组成,分别为PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-CC和PDGF-DD,以及一种异二聚体,PDGF-AB,主要作用于结缔组织。PDGF-BB可与PDGFR-β结合,随后激活几个细胞内信号级联,包括MAPK和PI3K/Akt通路,进而激活下游靶mTOR和p70S6K。PDGF-BB在胚胎发育、细胞增殖、细胞迁移、存活和趋化性的调节中发挥着重要作用。作为一种同源二聚体,也是间充质来源细胞的有效有丝分裂原,是中枢神经系统、皮肤、肺、心脏和胎盘中周细胞和血管平滑肌细胞正常增殖和募集所必需的。PDGF-BB也对正常的血管发育、肾小球的正常发育和伤口愈合至关重要。
翌圣Human PDGF-BB ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人血小板衍生生长因子(Human PDGF-BB)。特异性抗人血小板衍生生长因子抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人血小板衍生生长因子与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人血小板衍生生长因子的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 |
97042ES48 / 97042ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测时长 |
4.5小时 |
灵敏度 |
4.8 pg/mL |
稀释线性 |
79.0 - 121% |
回收率 |
77.0 - 114% |
板内差 |
3.8% |
板间差 |
5.0% |
实验数据
浓度(pg/mL) |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
1000 |
3.047 |
2.996 |
3.022 |
3.023 |
500 |
1.782 |
1.779 |
1.780 |
1.773 |
250 |
0.818 |
0.873 |
0.845 |
0.859 |
125 |
0.387 |
0.398 |
0.392 |
0.384 |
62.5 |
0.188 |
0.186 |
0.187 |
0.179 |
31.3 |
0.105 |
0.101 |
0.103 |
0.099 |
15.63 |
0.057 |
0.058 |
0.057 |
0.068 |
0 |
0.019 |
0.019 |
0.019 |
/ |
数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
人PDGF-BB的最低检测限为4.8 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
24 |
24 |
24 |
|
平均值 |
594.4 |
166.8 |
44.3 |
603.3 |
166.6 |
44.7 |
标准差 |
16.3 |
5.2 |
2.5 |
20.1 |
6.6 |
3.5 |
变异系数(%) |
2.7 |
3.1 |
5.6 |
3.3 |
4.0 |
7.8 |
通过不同水平的PDGF-BB添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
89.8 |
76.7-106.8 |
血浆 |
104.1 |
94.6-113.9 |
细胞培养上清 |
89.7 |
78.2-102.4 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
99.5 |
83.8-111.6 |
1:04 |
95.8 |
83.5-108.9 |
1:08 |
98.6 |
84.7-110 |
1:16 |
106.6 |
92.6-121 |
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
115.6 |
115.2-116 |
1:04 |
114.6 |
113.3-115.9 |
1:08 |
105.1 |
102.7-107.6 |
1:16 |
104.3 |
98.2-110.4 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
105.5 |
85-116.5 |
1:04 |
99.5 |
82.2-119.5 |
1:08 |
99.0 |
79.1-118 |
1:16 |
103.5 |
86.9-120.0 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(ng/mL) |
样本值(ng/mL) |
血清 |
10 |
1554 |
680-2103 |
EDTA血浆 |
6 |
2027 |
682-3586 |
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组人PDGF-BB,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
|
β-ECGF |
IGF-1 |
GM-CSF |
β-NGF |
IGF-2 |
IFN-γ |
EGF |
PD-ECGF |
PDGF-CC |
FGF acidic |
PDGF-AA |
TNF-α |
FGF basic |
PDGF-CC |
|
FGF-4 |
PDGF Rα |
|
FGF-5 |
SPARC |
|
FGF-6 |
VEGF |
|
HB-EGF |
|
|
Ver. CN20231102