Human Flt-3 Ligand/FLT3L ELISA Kit

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Fms样酪氨酸激酶3配体(FLT3L),也称为Flt-3配体,是造血的重要调节因子。其受体Flt3在髓系、淋巴系和树突状细胞祖细胞上表达,Flt3的激活突变经常在急性髓细胞白血病(AML)患者中发现,并与不良的临床预后有关。成熟的人FLT3L由一个158个氨基酸的细胞外结构域、一个细胞因子样结构域和一个近膜系链区、一个21个氨基酸的跨膜片段和一个30个氨基酸的细胞质尾部组成。人和小鼠有大约72%相同氨基酸序列,并且这两种蛋白质表现出跨物种活性。同时FLT3L可表现出抗肿瘤活性,可能是由于其募集树突细胞并引起其增殖的能力。

翌圣Human FLT3L ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的FLT3L。特异性抗FLT3L抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的FLT3L与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中FLT3L的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97019ES48 / 97019ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.63-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4.5小时

灵敏度

9.65 pg/mL

稀释线性

75 - 125%

回收率

81 - 115%

板内差

5.1%

板间差

8.5%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。

  1. 灵敏度检测

FLT3L的最低检测限为9.65 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

8

8

8

24

24

24

平均值

387.6

101.7

19.8

421.2

97.1

20.8

标准差

20.5

4.9

1.0

43.2

6.2

1.8

变异系数%

5.3

4.9

5.1

10.3

6.4

8.9

  1. 回收率检测

 通过不同水平的FLT3L添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

107.2

95.4-113.2

血浆

104.2

87.2-115.3

细胞培养上清

95.7

81.4-109.4

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

102.3

93.1-106.4

1:04

95.7

92.3-104.6

1:08

102.4

97.0-109.7

1:16

99.9

94.7-109.0

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

95.6

95.4-96.0

1:04

96.7

82.7-10.9

1:08

88.2

75.9-104.3

1:16

103.0

74.7-125.5

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

102.2

97.7-106.1

1:04

91.2

78.5-96.4

1:08

91.9

85.0-96.9

1:16

110.5

97.1-121.5

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

12

36.4

34.9-60.3

血浆

8

39.6

24.8-48

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组FLT3L,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

EGF

Epo

G-CSF

GM-CSF

M-CSF

HGF

TGF-β1

VEGF

 

检测简图

 

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883