人血管内皮生长因子 (Human VEGF)是PDGF家族的一员，是胎儿和成人血管生成和血管发生的有效介质。VEGF通过成骨细胞和成软骨细胞募集促进骨形成。出生后，VEGF维持内皮细胞的完整性，并且是微血管和大血管内皮细胞的有效有丝分裂原。在成人中，VEGF主要在伤口愈合和女性生殖周期中发挥作用。在病变组织中，VEGF促进血管通透性。因此，它被认为通过促进外渗和肿瘤血管生成而有助于肿瘤转移。

翌圣Human VEGF ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人血管内皮生长因子(Human VEGF)。特异性抗人血管内皮生长因子抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人血管内皮生长因子与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人血管内皮生长因子的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 主波长，630nm次波长测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97053ES48 / 97053ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	23.4-1500 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	0.9 pg/mL
稀释线性	70.6 - 126.0%
回收率	70.5 - 128.6%
板内差	5.9%
板间差	5.73%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

2. 灵敏度检测

人血管内皮生长因子的最低检测限为0.9 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	20	20	20	36	36	36
平均值	32.4	157.5	659.4	32.92	158.55	655.76
标准差	1.7	8.9	45.8	1.8	4.2	58.6
变异系数（%）	5.2	5.6	7.0	5.6	2.6	8.9

4. 回收率检测

 通过不同水平的人血管内皮生长因子添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	104.3	76.7-128.6
血浆	88.6	70.5-103.1
细胞培养上清	94.2	78.8-119.4

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	102.5	88.4-115.2
1:04	109.3	96.9-126.0
1:08	98.1	70.6-124.9
1:16	93.8	71.7-122.3

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	104.5	101.3-108.5
1:04	99.3	93.6-102.8
1:08	84.8	81.4-87.4
1:16	79.4	73.8-86.7

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	110.4	108.5-112.5
1:04	101.8	97.8-106.5
1:08	104.0	94.0-112.7
1:16	88.8	84.7-95.8

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	10	217	100-624
血浆	10	344	62-674
细胞培养上清	10	459	60-537

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得62.5 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组VEGF，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human	Recombinant mouse	Recombinant rat
PlGF	PlGF-2	VEGF164
VEGF-B167	VEGF120
VEGF-B186	VEGF164
VEGF-C
VEGF-D