Human BMP-7 ELISA Kit 人骨成型蛋白-7ELISA试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

人骨成型蛋白-7 (Human BMP-7)是TGF-β超家族的成员,被认为是软骨细胞最有效的合成代谢因子之一。人BMP-7的生长因子结构域与小鼠和大鼠BMP-7具有98%的氨基酸序列同一性。BMP-7在多种器官系统中发挥作用。它促进新骨的形成和肾单位的发育,抑制前列腺上皮的分化,并拮抗上皮-间质转化。骨形态发生蛋白(BMP)信号传导调节一系列细胞过程,并在早期胚胎的模式化中发挥重要作用。已知BMP-7的表达对糖尿病肾病期间的肾损伤具有保护作用,并且在糖尿病肾病进展期早期消失。BMP7的可能临床应用还有基于其在中风动物模型中的神经保护作用。

翌圣Human BMP-7 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的BMP-7。特异性抗BMP-7抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的BMP-7与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中BMP-7的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97007ES48 / 97007ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

62.5-4000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4.5小时

灵敏度

44.6 pg/mL

稀释线性

86 - 127%

回收率

81 - 126%

板内差

3.3%

板间差

4.2%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

  1. 灵敏度检测

BMP-7的最低检测限为44.6 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

10

10

10

30

30

30

平均值

2004.8

458.1

115.7

1999.2

453.6

114.2

标准差

106.5

12.6

2.0

101.1

17.1

4.1

变异系数%

5.3

2.7

1.8

5.1

3.8

3.6

  1. 回收率检测

 通过不同水平的BMP-7添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

101.3

86.1-126.4

血浆

103.9

81.8-122.1

细胞培养上清

103.6

89.0-126.4

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

113.9%

105.8-127.8

1:04

107.7%

104.1-113.9

1:08

97.4%

90.7-101.4

1:16

95.3%

87.2-101.6

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

110.8%

106.8-113.5

1:04

113.9%

95.8-122.2

1:08

96.5%

86.3-106.6

1:16

103.9%

91.5-118.6

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

102.0%

101-103.1

1:04

110.9%

104.3-119.7

1:08

97.8%

94.3-102.0

1:16

98.6%

94.9-103.3

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

6

n.d.

n.d.

血浆

12

n.d.

n.d.

细胞培养上清

8

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得62.5 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组BMP-7,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

BMP-2

BMP-3

BMP-4

BMP-5

BMP-6

TGF-β1

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

 

400-6111-883