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人细胞程序性死亡-配体1 (PD-L1)也称为表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源体（B7 homolog 1，B7-H1），是人类体内的一种蛋白质，由CD274基因编码。PD-L1 是大小为 40kDa 的第一型跨膜蛋白，据信其在某些特殊情形（例如怀孕、组织移植、自体免疫疾病，以及诸如肝炎等某些疾病）下，与免疫系统的抑制有关。正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，促发具抗原特异性的细胞毒杀性T细胞（CD8+ Tcell增生）。而细胞程序性死亡受体-1（PD-1）与细胞程序性死亡-配体1（PD-L1）结合，可以传导抑制性的信号，减低淋巴结CD8+ T细胞的增生， 而且PD-1还可以借由调节Bcl-2基因，控制淋巴结中抗原特异性T细胞的聚积。
翌圣Human PD-L1 / B7-H1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人细胞程序性死亡-配体1(Human PD-L1 / B7-H1)。特异性抗人细胞程序性死亡-配体1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人细胞程序性死亡-配体1与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人细胞程序性死亡-配体1的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
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货号 |
97043ES48 / 97043ES96 |
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规格 |
48 T / 96 T |
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检测范围 |
156.3-10000 pg/mL |
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检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
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灵敏度 |
2.0 pg/mL |
|
稀释线性 |
94.6 - 128.3% |
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回收率 |
74.3 - 106.8% |
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板内差 |
3.2% |
|
板间差 |
6.3% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
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浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
10000.0 |
2.695 |
2.657 |
2.676 |
2.625 |
|
5000.0 |
2.075 |
2.047 |
2.061 |
2.010 |
|
2500.0 |
1.460 |
1.444 |
1.452 |
1.401 |
|
1250.0 |
0.933 |
0.925 |
0.929 |
0.878 |
|
625.0 |
0.595 |
0.569 |
0.582 |
0.531 |
|
312.5 |
0.354 |
0.339 |
0.347 |
0.296 |
|
156.3 |
0.212 |
0.197 |
0.204 |
0.154 |
|
0.0 |
0.052 |
0.050 |
0.051 |
/ |
- 灵敏度检测
人PD-L1的最低检测限为2.0 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
4556.3 |
1196.1 |
302.9 |
4801.1 |
1240.1 |
314.6 |
|
标准差 |
203.58 |
27.89 |
8.77 |
415.38 |
61.13 |
17.08 |
|
变异系数（%） |
4.5 |
2.3 |
2.9 |
8.7 |
4.9 |
5.4 |
- 回收率检测
通过不同水平的PD-L1添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
91.7 |
84.8-104.2 |
|
血浆 |
80.6 |
74.3-91.0 |
|
细胞培养上清 |
93.8 |
86.0-106.8 |
- 稀释线性检测
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血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
102.5 |
100.8-104.8 |
|
1:04 |
110.1 |
103.1-119.0 |
|
1:08 |
111.6 |
106.0-119.6 |
|
1:16 |
112.9 |
106.0-118.6 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
104.3 |
100.8-107.7 |
|
1:04 |
114.8 |
112.0-117.7 |
|
1:08 |
117.4 |
114.7-120.0 |
|
1:16 |
123.2 |
117.6-128.3 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
97.3 |
95.4-98.9 |
|
1:04 |
99.0 |
94.9-101.7 |
|
1:08 |
96.9 |
94.6-98.4 |
|
1:16 |
101.3 |
99.7-102.3 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（ng/mL） |
样本值（pg/mL） |
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血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
EDTA血浆 |
6 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得156.3 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人PD-L1，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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B7-1/Fc Chimera |
Mouse B7-H1/Fc Chimera |
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B7-2/Fc Chimera |
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B7-H2/Fc Chimera |
|
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B7-H3 |
|
|
B7-H4 |
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|
B7-H6/Fc Chimera |
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|
PD-L2/Fc Chimera |
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Ver. CN20231205
