人骨成型蛋白-4 (Human BMP-4)是9种结构相关的BMP之一，属于转化生长因子β（TGF-β）超家族。人BMP-4与小鼠BMP-4具有98%的序列一致性。成熟的BMP-4是一种二聚体，与具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的多聚体跨膜受体结合。BMP-4是一种体外和体内软骨生成的刺激因子，是软骨再生的潜在治疗剂。BMP-4的递送可以通过刺激软骨基质成分II型胶原和聚集蛋白聚糖的合成来改善关节软骨缺损的愈合过程。BMP-4也被证明可以抑制软骨生成性肥大并维持再生软骨。

翌圣Human BMP-4 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的BMP-4。特异性抗BMP-4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的BMP-4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中BMP-4的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97006ES48 / 97006ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	15.63-1000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	11.2 pg/mL
稀释线性	86 - 127%
回收率	75 - 126%
板内差	4.0%
板间差	5.0%

 

实验数据

1. 标曲数据

2. 灵敏度检测

BMP-4的最低检测限为11.2 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	10	10	10	30	30	30
平均值	423.6	120.5	56.2	410.8	118.6	56.6
标准差	18.7	3.2	2.8	29.5	3.4	2.8
变异系数（%）	4.4	2.7	5.0	7.2	2.8	5.0

4. 回收率检测

 通过不同水平的BMP-4添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	94.6	74.8-117.8
血浆	111.5	89.6-124.4
细胞培养上清	114.6	107.6-126.7

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	108.3	97.2-127.2
1:04	116.7	115.1-118.2
1:08	114.8	114.6-115.1
1:16	111.5	109.3-112.7

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	116.2	101.7-127.5
1:04	118.3	113.8-121.1
1:08	108.0	99.5-116.4
1:16	106.7	92.7-120.8

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	89.8	86.3-96.2
1:04	100.2	98.4-102.9
1:08	104.2	98.5-108.8
1:16	103.1	98.4-106.4

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	6	n.d.	n.d.
血浆	12	8.9	n.d. -107.8
细胞培养上清	8	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组BMP-4，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

BMP-2

BMP-5

BMP-6

BMP-7

TGF-β1