ThermoSalt RNA 连接酶2(70 μM) ThermoSalt RNA Ligase 2（14656ES）

ThermoSalt RNA Ligase 2是本公司自主研发的一款新型dsRNA连接酶，该酶在 ATP 存在的条件下，可高效催化 RNA 链的分子间及分子内连接。与常规T4 RNA Ligase 2相比，ThermoSalt RNA Ligase 2具有耐高温和耐高盐的双重独特优势。应用数据表明，在 70°C 高温条件下，该酶仍可维持 90% 以上的连接活性；在 300 mM NaCl 高盐环境中，其活性也超过 50%，能够充分满足复杂样本或特殊反应条件的应用需求。‌‌

• 耐高温性能：70 ℃ 高温条件下仍保留 50% 以上连接活性，可与需要高温解链或高温处理的步骤衔接，对结构复杂的 RNA 底物也能获得更好的连接效果。
• 耐高盐性能：300 mM NaCl 高盐体系下仍具活性，可直接在含盐体系中进行连接，减少为迁就低盐条件而额外稀释、换液的操作。
• 宽温度窗口：25–70 ℃ 范围内均可反应，25 ℃、45 ℃、70 ℃ 下均验证有效，适配不同底物与工艺条件。
• 底物兼容性：可连接双链 RNA 中的切刻，也适用于以 DNA 为夹板的 RNA 底物切刻连接，并兼容 2′-F、2′-OMe、2′-F/OMe 修饰 dsRNA。

• 基础连接活性：同等酶量下优于经典 T4 RNA Ligase 2

图1. ThermoSalt RNA Ligase 2 与 T4 RNA Ligase 2 连接活性比较

注：在相同酶投入量梯度（0.25 / 0.125 / 0.063 / 0.031 U）下进行连接反应，ThermoSalt RNA Ligase 2 的连接效率优于 T4 RNA Ligase 2。（ThermoSalt RNA Ligase 2 活性约为 30 U/μL，即70 pmol≈30 U）

• 耐热性能：70 ℃孵育 30 min，保留 50% 以上连接效率

图2. 不同反应温度下 ThermoSalt RNA Ligase 2 与 T4 RNA Ligase 2 的耐热性比较

注：在 25–90℃ 温度梯度下比较（酶投入量 0.25 U，反应 30 min）。T4 RNA Ligase 2 随温度升高活性迅速下降；ThermoSalt RNA Ligase 2 在 70℃ 反应 30 min 连接效率仍可保留 50% 以上，耐热性显著优于 T4 RNA Ligase 2。

• 耐盐验证：300 mM NaCl 下仍保留 50% 以上连接活性

图3. 不同盐离子浓度下 ThermoSalt RNA Ligase 2 与 T4 RNA Ligase 2 的耐盐性比较

注：在 0–300 mM NaCl 梯度下比较（酶投入量 0.25 U）。T4 RNA Ligase 2 随盐浓度升高活性快速下降；ThermoSalt RNA Ligase 2 在 300 mM NaCl 条件下连接效率仍可保留 50% 以上，耐盐性显著优于 T4 RNA Ligase 2。

• 功能验证：

（1）夹板依赖型 RNA 连接活性优于 T4 RNA Ligase 2

图4. Splint夹板DNA介导的RNA连接活性对比

（2）可高效连接 2′-F、2′-OMe 及 2′-F/OMe 修饰 dsRNA

图5. 2′-F、2′-OMe及2′-F/OMe混合修饰dsRNA连接活性验证

注：反应条件：酶量0.3U，37℃，1h，2mMMgCl₂。A：2′-F修饰dsRNA；B：2′-OMe修饰dsRNA；C：2′-F/OMe混合修饰dsRNA；D：未修饰dsRNA。

（3）25 ℃、45 ℃、70 ℃ 下均可有效连接，25 ℃ 连接效率最高

图6. 不同温度（25℃、45℃、70℃）下修饰dsRNA连接效果。

注：A：2′-F修饰dsRNA；B：2′-OMe修饰dsRNA；C：2′-F/OMe混合修饰dsRNA。

（4）2–5 mM Mg²⁺ 浓度下连接效率最佳

图7. 不同Mg²⁺浓度（2/5/10mM）下修饰dsRNA连接效果

注：反应条件：酶量0.3U，45℃，1h。A：2′-F修饰dsRNA；B：2′-OMe修饰dsRNA；C：2′-F/OMe混合修饰dsRNA；NC：无酶阴性对照；PC：未修饰底物阳性对照。

-25~-15℃储存，有效期2年。