T4 DNA连接酶（T4 DNA Ligase）是一种由T4噬菌体编码的酶，以ATP作为辅因子，催化双链DNA或RNA的5’-磷酸与3’-羟基之间形成磷酸二酯键。该酶既能催化黏性末端分子间或平末端分子间的连接，也能修复双链DNA或DNA-RNA杂交双链上的单链DNA切口，广泛用于NGS测序，分子克隆等应用。
图1.T4 DNA Ligase反应原理图
多年来，翌圣生物始终致力于生命科学试剂的研发与创新，特别是在分子酶领域，凭借深厚的专业积淀和技术实力，在该领域取得了显著成绩，为广大的生命科学研究者提供了可靠且高效的分子酶产品。依托翌圣镁孚泰生物ZymeEditor™酶改造平台（了解更多）定向筛选出一系列性能卓越的分子酶原料，提供耐高温、高灵敏、缺失腺化功能等多个方向的T4 DNA 连接酶产品，面向科研、诊断等多个应用场景，打造全网最全面的T4 DNA连接酶系列产品供应商。
表1.翌圣T4 DNA Ligase系列产品
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产品特性 |
产品名称 |
货号 |
主要应用 |
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耐高温、低自连 |
Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) |
12996ES |
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兼容多样本、 超低残留 |
10299ES |
特别适合病原检测，NIPT检测等。 |
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超高灵敏度 |
10298ES |
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超低接头自连 |
14960ES |
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常规款 |
10301ES |
分子克隆；NGS建库接头连接 |
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10300ES |
分子克隆；线性DNA的自环化 |
Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) （Cat#12996ES）
依托翌圣镁孚泰生物的ZymeEditor™酶改造平台对野生型T4 DNA连接酶进行改造，得到一种在连接效率、接头自连以及热稳定性上均远优于传统野生型T4 DNA Ligase，可催化黏性末端或平末端分子间的连接反应，应用于NGS建库中的DNA片段与接头连接。该产品已经通过高通量测序验证，质量优异，货架期更持久！
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图2.42℃热稳定性测试
将翌圣生物的Hieff® Versatile T4 DNA Ligase与品牌N*、品牌A* 、品牌T*以及品牌Q*的T4 DNA连接酶进行42℃下0、2 、4 h的热处理。接着，使用翌圣生物DNA建库试剂盒（Cat#12927ES）、投入1 µg断裂的牛gDNA来构建全基因组DNA库。
结果表明：翌圣生物的Hieff® Versatile T4 DNA Ligase的热稳定性优于品牌N*、品牌A* 、品牌T*、品牌Q*。
更多数据详情点击：https://www.yeasen.com/news/detail/1716
Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) （Cat#12996ES）
翌圣针对NGS建库过程中DNA片段和接头连接专门开发了Fast T4 DNA连接酶，该酶具有高效的连接能力，不仅连接速度快，而且兼容各类样本，对于复杂结构核酸片段的连接更显优势。目前已经过大量客户的高通量测序验证，对于华大平台的Bubble接头的连接，也能得到稳定的测序质量。
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表2.不同种类样本文库产量
使用肠道微生物、cfDNA和FFPE HD200 gDNA三种样本构建NGS文库，以此检验翌圣Fast T4 DNA Ligase与品牌N*的建库能力。
结果表明：翌圣生物的Fast T4 DNA Ligase在不同样本类型的文库构建中均展现出了更高的效率和产量。
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Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)（Cat#10298ES）
依托翌圣镁孚泰生物的ZymeEditor™酶改造平台对野生型T4 DNA连接酶进行改造，将T4 DNA Ligase的有效催化活性结构域通过多轮突变筛选，得到一种连接活性更强的突变体。采用高纯度的生产标准和严格的质量检测，有效去除核酸酶、切口酶的残留，连接时间只需15min，成功打造一款快速高效的DNA连接酶—Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)（Cat#10298ES）。
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图3.双端均连接接头检测
使用翌圣生物和竞品的Novel T4 DNA Ligase进行 cfDNA样本的NGS文库构建测试（连接Y型建库接头），通过Agilent 2100检测双端均连接接头的片段比例。
结果表明：翌圣生物的Fast T4 DNA Ligase具有极高的连接活性，完美适配cfDNA样本。
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Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/µL)（Cat#14960ES）
依托翌圣镁孚泰ZymeEditor™酶改造平台，对野生型T4 DNA Ligase进行定向改造获得Hieff® 5' App T4 DNA Ligase，该产品只能以预苷化接头为底物进行接头连接，能显著减少片段自连，提高文库转化率。
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图4.连接效率检测图
以100ng 170bp和300bp的模式片段为底物，使用翌圣Hieff® 5' App T4 DNA Ligase对合成的预腺苷化（App）接头进行接头连接，结果显示连接效率达95%以上，且片段自连占比极低。
结果表明：翌圣生物的Hieff® 5'App T4 DNA Ligase具有极高的连接效率和极低的自连。
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