Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix是2×实时定量PCR扩增的预混液，具有高灵敏度和高特异性的特点，同时，定量PCR可以在宽广的定量区域内获得良好的线性关系。核心组分Hieff® miRNA Taq DNA聚合酶采用抗体法热启动，再配以优化的Buffer，可以有效抑制样品准备过程中引物退火导致的非特异性扩增。另外，预混液体系中添加了ROX Reference Dye，能够适用于不同qPCR仪器，配置反应体系时只需加入引物和模板即可进行扩增。

• 灵敏度高：可达10pg
• 特异性高：能区分同家族miRNA间单碱基差异
• 重复性好：90孔复孔数据显示孔间误差小
• 稳定性好：37℃稳定14天或冻融稳定50次或配置体系在25℃保留24h后，效果依旧稳定

• 灵敏度高，可达10 pg

图.以小鼠肝脏细胞的Total RNA为模板，用Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)（Cat# 11139ES）进行反转录，获得的cDNA 以10倍梯度稀释（范围10pg /μL-0.1μg /μL），扩增鼠源的mmu-miR-125a、mmu-miR-132、mmu-miR-351基因。

• 高特异性，能区分同家族miRNA间单碱基差异

图. 人类hsa-let-7家族拥有多条miRNA，彼此间相差的碱基很少，甚至只有单碱基的差异。以不同的引物，使用 Hieff® miRNA Universal  qPCR SYBR Master Mix（Cat# 11170ES）分别扩增这些miRNA，利用公式2^^-△ct x 100%计算匹配率。

• 重复性好

图.以人293T细胞的Total RNA为模板反转录，用Hifair^® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)（Cat# 11139ES）进行反转录，获得的cDNA稀释50倍，使用Hieff^® miRNA Universal  qPCR SYBR Master Mix（Cat# 11170ES）进行90孔平行重复实验扩增人源的hsa-let-7a基因。

冰袋运输。-20℃可避光保存，有效期18个月。

本品避免反复冻融。产品中含有荧光染料 SYBR Green I，保存或配制反应体系时需避免强光照射。

Q：如果要研究多个miRNA定量实验，每个miRNA是否均要单独设计一条茎环引物进行逆转录？

A：是的，针对每个miRNA都要设计一条特异的茎环逆转录引物，一管反应中只能逆转一个miRNA，内参也是这样做。