Mouse IL-6 ELISA Kit 小鼠白介素6 ELISA试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

白细胞介素6(IL-6)最初被鉴定为B细胞分化因子,现在已知是一种多功能细胞因子,可调节免疫反应、造血、急性期反应和炎症,其有3个受体结合位点,包括1个特异性受体IL-6R 结合位点,和2个gp130结合位点。IL-6是一种多效性、α螺旋、22-28kDa的糖蛋白,在急性期反应、炎症、造血、骨代谢和癌症进展中发挥重要作用,人IL-6与小鼠和大鼠IL-6具有39%的aa序列同一性。它是一种多效性细胞因子,不仅影响免疫系统,还作用于其他生物系统和各种器官的许多生理事件,同时也能诱导骨髓瘤和浆细胞瘤的生长。

翌圣Mouse IL-6 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素6(Mouse IL-6)。特异性抗小鼠白介素6抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠白介素6与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素6的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

98027ES48 / 98027ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.63-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

小鼠

检测时长

4.5小时

灵敏度

9.37 pg/mL

稀释线性

74 - 107%

回收率

77 - 111%

板内差

3.1%

板间差

5.7%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。

  1. 灵敏度检测

IL-6的最低检测限为9.37 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

8

8

8

24

24

24

平均值

614.01

165.44

39.27

622.44

161.44

42.01

标准差

16.25

5.85

1.29

24.60

6.54

3.82

变异系数%

2.6

3.5

3.3

4.0

4.0

9.1

  1. 回收率检测

 通过不同水平的IL-6添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

94.4

85.5-108.6

血浆

96.3

81.6-111.1

细胞培养上清

90.2

77.5-102.2

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

81.6

77.8-87.1

1:04

94.4

91.3-98.9

1:08

96.8

92.7-103.9

1:16

97.6

88.5-103.6

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

94.5

84.0-107.2

1:04

96.2

88.9-100.2

1:08

102.3

99.0-106.7

1:16

82.2

74.4-92.5

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

86.3

82.5-89.6

1:04

95.4

93.3-98.1

1:08

97.7

91.7-102.7

1:16

97.2

96.0-99.4

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

10

n.d.

n.d.

血浆

8

33.6

n.d.-59.0

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素6。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

IL-1α

IL-8

IL-1α

IL-10

IL-1β

IL-10

IL-1β

IL-12

IL-2

IL-12

IL-2

IFN-γ

IL-4

IFN-γ

IL-4

VEGF

IL-5

VEGF

IL-5

TNF-α

IL-6

TNF-α

 

 

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883