小鼠白介素1β (Mouse IL-1β/IL-1F2)作为IL-1家族主要成员,也主要由活化的巨噬细胞产生,并通过诱导IL-2释放、促进B细胞成熟与增殖以及成纤维细胞生长因子激活来刺激胸腺细胞增殖,也可刺激滑膜细胞释放前列腺素及各种胶原酶。IL-1β在免疫和炎症反应、骨重塑、发热、碳水化合物代谢等生理现象起着核心作用。异常的IL-1β信号通过促进上皮向间充质转化、增加炎性细胞因子和趋化因子的产生、诱导免疫抑制和细胞凋亡抵抗以及增加白细胞粘附来驱动肿瘤发生。IL-1β导致炎症的发生疾病包括糖尿病、关节炎和动脉粥样硬化,此外IL-1β的异常激活也与大多数癌症类型的不良预后有关,包括结肠癌、肺癌和乳腺癌等。
翌圣Mouse IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素1β(Mouse IL-1β/IL-1F2)。特异性抗小鼠白介素1β抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠白介素1β与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素1β的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 |
98024ES48 / 98024ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测时长 |
4.5小时 |
灵敏度 |
11.46 pg/mL |
稀释线性 |
89 - 123% |
回收率 |
78 - 107% |
板内差 |
4.0% |
板间差 |
3.9% |
实验数据
数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。
IL-1β/IL-1F2的最低检测限为11.46 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
平均值 |
489.74 |
119.91 |
29.16 |
476.65 |
119.32 |
30.79 |
标准差 |
23.16 |
5.94 |
0.74 |
22.08 |
5.57 |
0.81 |
变异系数(%) |
4.7 |
5.0 |
2.5 |
4.6 |
4.7 |
2.6 |
通过不同水平的IL-1β/IL-1F2添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
94.6 |
81.2-107.6 |
血浆 |
82.8 |
78.0-91.0 |
细胞培养上清 |
87.9 |
81.4-94.1 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
103.0 |
98.1-106.9 |
1:04 |
105.5 |
101.3-106.6 |
1:08 |
111.3 |
105.2-123.3 |
1:16 |
94.5 |
89.5-98.3 |
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
103.6 |
101.2-106.2 |
1:04 |
105.3 |
101.8-107.7 |
1:08 |
107.0 |
105.9-107.6 |
1:16 |
101.5 |
96.4-106.2 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
98.0 |
94.8-100.0 |
1:04 |
98.5 |
91.1-103.4 |
1:08 |
102.9 |
95.0-107.6 |
1:16 |
100.1 |
90.8-104.9 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(mg/mL) |
样本值(mg/mL) |
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素1β。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
||
IL-1α |
IL-10 |
IL-1α |
IL-12 |
IL-1β |
IL-12 |
IL-2 |
IL-13 |
IL-2 |
IL-13 |
IL-3 |
IFN-γ |
IL-3 |
IFN-γ |
IL-4 |
TNF-α |
IL-4 |
TNF-α |
IL-6 |
VEGF |
IL-6 |
VEGF |
IL-10 |
|
检测简图
疑问解答
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
||
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
|
CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |