Mouse IL-1β ELISA Kit 小鼠白介素1β ELISA检测试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

小鼠白介素 (Mouse IL-1β/IL-1F2)作为IL-1家族主要成员,也主要由活化的巨噬细胞产生,并通过诱导IL-2释放、促进B细胞成熟与增殖以及成纤维细胞生长因子激活来刺激胸腺细胞增殖,也可刺激滑膜细胞释放前列腺素及各种胶原酶。IL-1β在免疫和炎症反应、骨重塑、发热、碳水化合物代谢等生理现象起着核心作用。异常的IL-1β信号通过促进上皮向间充质转化、增加炎性细胞因子和趋化因子的产生、诱导免疫抑制和细胞凋亡抵抗以及增加白细胞粘附来驱动肿瘤发生。IL-1β导致炎症的发生疾病包括糖尿病、关节炎和动脉粥样硬化,此外IL-1β的异常激活也与大多数癌症类型的不良预后有关,包括结肠癌、肺癌和乳腺癌等。

翌圣Mouse IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素1β(Mouse IL-1β/IL-1F2)。特异性抗小鼠白介素1β抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠白介素1β与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素1β的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

98024ES48 / 98024ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.63-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4.5小时

灵敏度

11.46 pg/mL

稀释线性

89 - 123%

回收率

78 - 107%

板内差

4.0%

板间差

3.9%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析

  1. 灵敏度检测

IL-1β/IL-1F2的最低检测限为11.46 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

10

10

10

30

30

30

平均值

489.74

119.91

29.16

476.65

119.32

30.79

标准差

23.16

5.94

0.74

22.08

5.57

0.81

变异系数%

4.7

5.0

2.5

4.6

4.7

2.6

  1. 回收率检测

 通过不同水平的IL-1β/IL-1F2添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

94.6

81.2-107.6

血浆

82.8

78.0-91.0

细胞培养上清

87.9

81.4-94.1

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

103.0

98.1-106.9

1:04

105.5

101.3-106.6

1:08

111.3

105.2-123.3

1:16

94.5

89.5-98.3

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

103.6

101.2-106.2

1:04

105.3

101.8-107.7

1:08

107.0

105.9-107.6

1:16

101.5

96.4-106.2

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

98.0

94.8-100.0

1:04

98.5

91.1-103.4

1:08

102.9

95.0-107.6

1:16

100.1

90.8-104.9

  1. 样本值
     

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(mg/mL)

样本值(mg/mL)

血清

10

n.d.

n.d.

血浆

8

n.d.

n.d.

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

IL-1α

IL-10

IL-1α

IL-12

IL-1β

IL-12

IL-2

IL-13

IL-2

IL-13

IL-3

IFN-γ

IL-3

IFN-γ

IL-4

TNF-α

IL-4

TNF-α

IL-6

VEGF

IL-6

VEGF

IL-10

 

 

检测简图

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883