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产品简介
Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上，进行特异性去除内毒素，经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL，且样品回收率高。
翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案，相关产品选购请参考：蛋白纯化系列产品-选购指南
产品信息
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货号 |
20518ES10/ 20518ES60/20518ES76 |
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规格 |
10 mL /100 mL / 500 mL |
产品性质
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基质（Matrix） |
4%琼脂糖微球 |
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配体（Ligand） |
修饰过的多粘菌素B |
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粒径（Bead size） |
45-165 µm |
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载量（Capacity） |
＞2000000 EU/mL基质 |
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最大压力（PressureMax） |
0.1 MPa, 1bar |
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pH稳定范围（pH range） |
5-10 |
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储存缓冲液（Buffer） |
20%乙醇 |
储存条件
2~8℃保存，有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理，防止在使用过程中引入内毒素。
平衡液：20 mM 磷酸盐，150 mM NaCl，pH7.4。
再生液：1% Triton X-114的平衡液
【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变，建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。
使用说明
【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子；
b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9，因此样品pH最好控制在7-8；
c 样品最好控制在适当的离子强度，减少非特异吸附，NaCl约150 mM-500 mM。
样品纯化（以1 mL树脂为例）
1）装柱：充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin，用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中，注意避免产生气泡，打开下出口去掉保护液，用3 mL再生液进行清洗，控制流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，温度控制在2~8℃，重复至少2次，确保柱中无内毒素。
2）平衡：用3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂，流干，流速约0.5 mL/min，温度控制在2~8℃，重复至少两次。
3）过柱及检测：将样品加到平衡好的树脂中，调节流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，当流出液流出约1 mL 时，开始收集流出液，流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。
【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值，继续重复1-3。
注意事项
1.本品可耐受试剂：20%DMSO,20%乙醇,20%甘油；1 M尿素,300 mM咪唑；0.05% Tween 20,10 mM DTT等。
2.本产品仅作科研用途。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表 问题及解决方案
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问题 |
原因分析 |
推荐解决方案 |
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内毒素去除效率低 |
样品pH值不在内毒素结合范围内 |
用0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8 |
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样品与树脂接触时间短 |
减少流速，增加样品接触时间 |
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去除或检测系统被内毒素污染 |
所有试验用品均需无热源产品 |
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内毒素与目的蛋白结合较强 |
优化样品pH，使样品与内毒素分离 增加接触时间 |
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样品被污染 |
树脂纯化过其他样品 |
不用使用过的树脂去除不同样品内毒素 |
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样品回收率低 |
样品非特异性吸附在树脂上 |
增加样品和平衡液的NaCl浓度 |
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目的蛋白与内毒素结合一起被去除 |
优化样品pH，使样品与内毒素分离 |
Ver.CN20230719
