蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。要研究某一个特殊蛋白质,首先就要将这个蛋白从生物体中分离纯化出来。蛋白纯化方法主要是利用不同蛋白质间的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。
【操作视频】
蛋白纯化方式多种多样,选择最适宜的纯化技术是蛋白质有效纯化的关键,优化操作过程来满足所要求达到的纯度,并且将它们以合适的方式组合起来,使用最少的纯化步骤达到蛋白产量的最大化。根据生物分子的不同性质进行蛋白的分离纯化的常用方法如下:
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凝胶过滤 |
离子交换 |
疏水层析 |
亲和纯化 |
分离机制 |
分子大小 |
蛋白表面所带电荷 |
疏水性 |
特异性亲和 |
选择性 |
中等 |
高 |
高-中等 |
非常高 |
载量 |
低 |
高 |
高 |
高 |
纯化速度 |
中等-低 |
高 |
高 |
高 |
生物相容性 |
非常好 |
好 |
中等-好 |
好 |
目标蛋白的得率 |
高 |
高 |
中等-高 |
高 |
翌圣生物可提供以上蛋白纯化方法中所需用到的优质试剂和耗材
纯化方法 |
试剂类型 |
产品类型 |
推荐产品 |
专题详解 |
凝胶过滤
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葡聚糖 凝胶层析 |
脱盐填料 脱盐预装柱 脱盐离心柱 脱盐重力柱 |
Desalting Column G25 M脱盐柱G25中(Cat#20590ES) Spin Desalting Column, 0.5 mL 离心脱盐柱, 0.5 mL(Cat#20599ES) Gravity Desalting Column, 8.3 mL 重力脱盐柱(Cat#20741ES) |
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琼脂糖 凝胶层析 |
填料 预装柱 |
Geldex 200 PG高分辨琼脂糖凝胶层析填料(10-600 kDa)(Cat#20598ES) Geldex 200 PG Chromatography Column 200 PG凝胶层析预装柱(Cat#20593ES) |
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离子交换 |
阴离子 交换层析 |
填料 预装柱 |
Q Agarose HP(Q强阴离子交换层析填料HP)(Cat#20460ES) Q HP强阴离子交换预装柱,5 mL(Cat#20462ES) |
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阳离子 交换层析 |
SP Agarose HP(SP强阳离子交换层析填料HP)(Cat#20463ES) SP HP强阳离子交换预装柱,5 mL(Cat#20465ES) |
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疏水层析 |
弱疏水 层析 |
填料 预装柱 |
高分辨率Butyl弱疏水层析介质(Cat#20484ES) Butyl HP弱疏水层析预装柱,5 mL(Cat#20485ES) |
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强疏水 层析 |
高分辨率phenyl强疏水层析介质(Cat#20486ES) Phenyl HP强疏水层析预装柱,5 mL(Cat#20487ES) |
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亲和纯化 |
His标签 蛋白纯化 |
树脂 预装柱 纯化磁珠 |
His标签蛋白琼脂糖纯化树脂(Cat#20502ES) His标签蛋白纯化预装柱,5 mL(Cat#20504ES) His标签蛋白纯化磁珠(Cat#20561ES) |
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GST标签 蛋白纯化 |
树脂 预装柱 纯化磁珠 |
谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)(Cat#20507ES) GST标签蛋白纯化预装柱,5 mL(Cat#20510ES) GST标签蛋白纯化磁珠(Cat#20562ES) |
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MBP标签 蛋白纯化 |
树脂 预装柱 |
MBP标签蛋白高度交联纯化树脂(Cat#20515ES) MBP标签蛋白纯化预装柱,5mL(Cat#20517ES) |
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Strep(Ⅱ)标签蛋白纯化 |
树脂 预装柱 |
Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(Cat#20495ES) |
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Bioti标签 蛋白纯化 |
树脂 预装柱 免疫磁珠 |
链霉亲和素琼脂糖纯化树脂(Cat#20512ES) 生物素分子纯化预装柱,5 mL(Cat#20514ES) 链霉亲和素(SAV)免疫磁珠(Cat#47503ES) |
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标签抗体 亲和纯化 |
凝胶 免疫磁珠 |
Anti-Flag亲和纯化凝胶(Cat#20584ES) Anti-HA亲和纯化凝胶(Cat#20586ES) Anti-Myc亲和纯化凝胶(Cat#20587ES) Anti-flag 免疫磁珠(Cat#20565ES) |
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抗体亲和 纯化 |
树脂 预装柱 免疫磁珠 |
耐碱重组蛋白A琼脂糖纯化树脂(Cat#36401ES) 蛋白G琼脂糖纯化树脂(Cat#36405ES) 蛋白A/G琼脂糖纯化树脂(Cat#36403ES) 蛋白A/G免疫磁珠(Cat#36417ES) |
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其他抗体 亲和纯化 |
树脂 预装柱 |
内毒素高效去除纯化树脂(Cat#20518ES) 肝素亲和纯化介质(Cat#20493ES) |
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其他产品 |
蛋白酶 |
标签切割酶 糖苷酶 质谱级酶 |
大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)(Cat#20401ES) 牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)(Cat#20402ES) rTEV Protease 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶(Cat#20403ES) PNGase F, N-糖苷酶 F(100000 U/mL)(Cat#20407ES) Recombinant Trypsin(MS-SAFE)重组胰蛋白酶(质谱级)(Cat#20416ES) |
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层析耗材 |
重力空柱 C型空柱 YXK柱 透析袋 |
12 mL 重力层析空柱(Cat#20523ES) 5 mL C型空柱(连接Akata、注射器或蠕动泵)(Cat#20526ES) YXK16/70层析空柱(Cat#20443ES) 27mm透析袋(截留分子量50 kDa)(Cat#20534ES) |
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