产品描述
Anti-HA亲和纯化凝胶(Anti-HA Affinity Gel)由高质量的鼠源 IgG1 单克隆抗体与sepharose 4B gel 通过供价偶联制备,本产品具有较高的HA标签融合蛋白加载容量(至少为1.5 mg protein/mL凝胶),杂蛋白非特异结合少,可用于带有HA标签的融合蛋白免疫沉淀(IP)和纯化。
推荐使用量:每500 μL蛋白粗体液需使用5 μL凝胶。
翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南
产品性质
克隆号(Clone) |
1A4 |
亚型(Isotype) |
Mouse IgG1 |
纯化方法(Purity) |
Protein A |
抗体浓度(Antibody Concentration) |
7.5g抗体/L凝胶 |
应用(Application) |
蛋白纯化,免疫沉淀(IP) |
蛋白结合量(Protein) |
≥1.5mg蛋白/mL凝胶 |
储存缓冲液(Buffer) |
10 mM Na3PO4,150 mM NaCl,50%甘油,pH 7.4,含有0.02%(w/v)叠氮钠 |
运输和保存方法
冰袋运输。未开封的产品在-20℃下可稳定保存1年。禁止在不含甘油的溶液中冻存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途!
使用方法
1)轻微重悬Anti-HA Affinity Gel,形成均一溶液。转移10 μL混合液(5μL gel)至新的离心管中。
2)加入500 μL TBS,轻轻的重悬Anti-HA Affinity Gel,5,000 rpm 离心30 s, 弃上清,重复上述步骤 3-4 次。
注意:尽可能去除上清,但不要吸到凝胶。
3)在上述沉淀中加入200-1000 μL细胞裂解液。4℃缓慢孵育2小时。
4)5,000 rpm 离心30 s,上清液转移到新的离心管中保存以后检测。
5)沉淀用0.5 mL TBS 洗3-4次,去尽上清。
6)洗脱:具体选择哪种洗脱条件取决于目的蛋白的特性或下游应用。
A.加入100 μL HA多肽(150 μg/mL)(Cat 20574ES)洗脱HA融合蛋白,4℃缓慢孵育30 min,5,000 rpm 离心30 s,收集上清。
B.用于SDS-PAGE电泳:加入10 μL 2×蛋白上样缓冲液,煮沸5 min。5,000 rpm 离心30 s,小心转移上清,用于SDS-PAGE检测。上样缓冲液中SDS会破坏抗体,所以亲和纯化凝胶不能重复使用。
HB221229