GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。在结构上，该树脂是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成，具有更高的物理化学特性，可以耐受更高的压力，在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化，更适于工业大规模蛋白的纯化。
GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL是装填了GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF的一种中压预装柱，规格5 mL，预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA 等，方便客户操作。
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基质（Matrix） |
高度交联的4%琼脂糖微球 |
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配体（Ligand） |
通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽 |
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粒径（Bead size） |
45-165 µm |
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载量（Capacity） |
>10 mg GST蛋白（40 kDa）/mL基质 |
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最大压力（PressureMax） |
0.3 MPa，3 bar |
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pH稳定范围（pH range） |
3-12 |
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储存缓冲液（Buffer） |
含20%乙醇的1×PBS |
2~8℃保存，有效期2年。
Q：为什么洗脱组分中无目的蛋白？
A：可能是目的蛋白聚集产生沉淀，建议在细胞裂解前溶液中加入 DTT，终浓度为 1-10 mM。
Q：为什么柱子反压过高？
A：可能是填料被堵塞，建议清洗树脂。
Q：为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带？
A：可能是Mr 70000 蛋白与目的蛋白一起纯化下来。Mr 70000 蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK 的产物，建议可以在目的蛋白中加入 50 mM Tris-HCl，2 mM ATP，10 mM MgSO4，pH 7.4 在 37℃加热 10min 去除。
Q：为什么目的蛋白没有完全洗脱下来？
A：可能是非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱，建议在洗脱液中加入非离子型洗涤剂，如 0.1%的 Triton X-100 或者 2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷 Tween-20。
Q：洗脱液怎么配？
A：按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽（货号：60342）即可，配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致，部分谷胱甘肽溶解后ph会偏酸。
- Wang Z, Yang B, Zheng W, et al. Recognition of glycoside hydrolase 12 proteins by the immune receptor RXEG1 confers Fusarium head blight resistance in wheat. Plant Biotechnol J. 2023;21(4):769-781. doi:10.1111/pbi.13995(IF:13.8)
- Yang B, Wang Y, Tian M, et al. Fg12 ribonuclease secretion contributes to Fusarium graminearum virulence and induces plant cell death. J Integr Plant Biol. 2021;63(2):365-377. doi:10.1111/jipb.12997(IF:4.885)
