耐盐T4 DNA连接酶(400 U/μL) HiSalt T4 DNA Ligase（14967ES）

HiSalt T4 DNA Ligase 是T4 DNA连接酶的耐盐突变体，能够催化双链DNA或RNA上相邻的5´磷酸末端与3´羟基末端之间形成磷酸二酯键。与野生型T4 DNA连接酶相比，该酶在高盐条件下具有更强的耐受性。其催化活性依赖ATP作为辅助因子，在盐浓度高达300 mM的条件下仍能有效发挥作用，不仅可连接平末端和粘性末端，还能修复双链DNA以及部分DNA/RNA杂交链中的单链切口。‌‌

基于上述特性，HiSalt T4 DNA Ligase 可广泛应用于以下应用场景：

• 限制酶切片段直接连接，免纯化、免脱盐：限制性内切酶消化后的 DNA 片段常带有缓冲液中的盐分，直接连接时野生型 T4 DNA Ligase易被抑制。HiSalt T4 DNA Ligase 对盐不敏感，可在酶切后直接连接或仅做简单处理，减少纯化步骤带来的样本损失与时间消耗。
• NGS 文库构建的接头连接：接头连接效率直接影响文库产量与数据质量，样本或缓冲液残留的盐分会抑制野生型 T4 DNA Ligase。HiSalt T4 DNA Ligase 耐盐性更佳，有助于在含盐体系中稳定完成接头连接，尤其适合低起始量、微量样本建库。
• 常规分子克隆与 TA/平末端克隆：适用于粘性末端、平末端片段的克隆与连接，以及 Linker/Adapter 与 DNA 片段的连接。耐盐特性使其在多样化的缓冲条件中均能保持稳定表现，拓宽了克隆方案的兼容性。
• 高盐缓冲体系与自动化/高通量工作流：当实验需要在较高盐浓度的缓冲液中直接连接，或采用自动化、高通量平台批量操作时，减少纯化/换液环节尤为关键。HiSalt T4 DNA Ligase 可在高盐条件下维持连接活性，帮助简化流程、提升通量与一致性。

• 高盐耐受：750 mM NaCl 下仍保留 >60% 相对活性

图1. 不同 NaCl 浓度下三种 T4 DNA Ligase的相对活性比较（以 0 mM NaCl 的活性为 100%）

注：在统一反应体系中，将翌圣 HiSalt T4 DNA Ligase（14967ES）与进口耐盐 T4 DNA Ligase（Supplier A*）、野生型 T4 DNA Ligase（WT）分别置于 0、100、200、400、500、750 mM NaCl 条件下进行连接测试，以 0 mM NaCl 时的连接活性为 100% 计算相对活性。结果显示，在 400–750 mM 区间，翌圣 HiSalt T4 DNA Ligase 相对活性显著高于野生型和进口耐盐 T4 DNA Ligase。

• 宿主gDNA残留低：< 1 copy / 400 U

图2. HiSalt T4 DNA Ligase 宿主gDNA残留质控结果

注：使用翌圣E.coli宿主细胞DNA残留检测试剂盒（2G）（Cat#41318）对3批次的HiSalt T4 DNA Ligase进行宿主（E.coli）gDNA残留检测。结果显示3批次gDNA残留量均满足< 1 copy / 400 U标准，确保了检测结果的可靠性。

• 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留：有效保障核酸样本完整性

图3. HiSalt T4 DNA Ligase 核酸酶残留质控结果

注：经琼脂糖凝胶电泳检测，HiSalt T4 DNA Ligase与核酸底物共同孵育后，与对照品比，电泳条带清晰、单一，未见降解或拖尾现象，可避免核酸样本发生降解。

-25~-15℃储存，有效期2年。