——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR
常见的gDNA消化去除通常在正式反转录步骤之前,加入gDNA消化去除组分后,需在特定温度下反应一段时间,反应冷却后再加入相关的反转录组分进行反转录,步骤多且耗时通常在半小时左右。
在检测基因表达水平时,RNA样品中的基因组DNA(gDNA)残留是一个潜在的风险。gDNA可能会与目的RNA共同扩增,从而产生假阳性的现象,例如Ct值偏小、Ct值波动以及熔解曲线双峰。
▲ Ct值偏小/Ct值波动
Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)
一步完成:一步完成gDNA去除和反转录;
快速反应:消化&反转仅需5分钟;
高效合成:可保证100 pg RNA反转录;
产物稳定:cDNA产物可长久稳定保存。
图. 以人293T细胞RNA为模板,分别检测三种基因。品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反转录的产量均优于其他品牌,Ct值更小。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)
图. 以人293T细胞RNA为模板,扩增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分别投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA进行反转录并进行荧光定量检测。结果显示,11151ES可满足100 pg-1 μg RNA的反转录。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)
试剂盒稳定性好
方法 |
分类 |
产品名称 |
货号 |
RNA提取 |
同Trizol提取 |
TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent |
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免氯仿升级版 |
TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free) |
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动物组织/细胞总RNA提取,避开有毒试剂,最快15 min完成 |
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit细胞/组织总RNA提取试剂盒 |
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qPCR染料法 |
高灵敏通用型定量预混液(染料法) |
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix |
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超高性价比定量预混液 (染料法),已发文章累计IF达到5000+ |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
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反转录试剂 |
5 min快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)-示踪版New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit |
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5 min快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)-常规版New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye) |
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高质量第一链cDNA合成预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |