产品简介

 

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)是Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)的升级版，与前代Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase相比，本产品具有更强的残留物耐抑制性、更快的逆转录速度以及更高的逆转录产量，适用于动物、植物以及微生物RNA的逆转录反应。其中的gDNA digester Mix -V2的残留DNA消化能力大幅提升，可消化达1000 ng的DNA，更放心地避免了RNA模板中残留的DNA污染，保证后续结果更加可靠。Hifair® AdvanceFast SuperMix含有逆转录反应所需的所有组分，只需加入RNA模板和RNase-free H₂O即可进行逆转录反应，并同时终止gDNA digester的作用，保证cDNA的完整性。

本产品逆转录产物适用于染料法和探针法qPCR，不适用于后续基因克隆等长片段扩增，如果需要，推荐翌圣Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149ES、Cat#11150ES)进行高效逆转录。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	11155ES10	11155ES60
11155-A	Hifair® AdvanceFast SuperMix	60 μL	600 μL
11155-B	gDNA Digester Mix -V2	20 μL	200 μL
11155-C	RNase free H2O	200 μL	1 mL×2

 

储存条件

 

-25℃ ~ -15℃保存，有效期1年。逆转录产物可立即用于后续反应，也可4℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-20℃保存，避免反复冻融。

 

使用说明

 

一、若实验需要去除残留DNA

1. DNA消化

在RNase-free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。37℃孵育2 min。

组分	使用量
DNA Digester Mix -V2	2 μL
Total RNA	10 pg -2 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng
RNase-free H2O	补水至 14 μL

* 建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反转录反应体系配制 (20 μL体系)

组分	使用量
上一步的反应液	14 μL
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL

3. 反应程序

温度	时间
50℃	5 min
85℃	5 s

二、若实验无需去除残留DNA

1. 反转录反应体系配制 (20 μL体系)

组分	使用量
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL
Total RNA	10 pg -2 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng
RNase-free H2O	补水至 20 μL

* 建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反应程序

温度	时间
50℃	5 min
85℃	5 s

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 加样和配液步骤都尽量在冰上操作。

4. 每个组分在使用前都应上下颠倒混匀，低速离心。

 

 

Ver.CN20241030