Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)基于Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比，Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase热稳定性大幅度提高，可耐受高达60℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

该预混液包含5×gDNA digester Mix和4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus。5×gDNA digester Mix可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus 含有逆转录反应所需的所有组分（Buffer，dNTP，Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase，RNase inhibitor，Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix），只需加入RNA模板和 RNase-free H2O即可进行逆转录反应，并同时终止gDNA digester的作用，保证cDNA的完整性。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测，针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，并具有相同的逆转录效率，最大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容SYBR® Green和探针法qPCR，可以根据实验目的，选择Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix，Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix或Hieff® qPCR TaqMan Probe Master Mix等试剂配合使用，进行高性能的基因表达分析。

产品组分

• 耐热性：耐受65℃，适合高GC及具有复杂二级结构的RNA模板
• 高效逆转录：相对市面同类产品具有更高的逆转录效率
• 宽广的线性检测范围：在宽广模板范围内（Total RNA 10 pg-5 μg）均可高效合成cDNA
• 高效去除基因组残留：试剂盒自带组分可高效去除残留基因组，且无需额外失活操作
• 模板投入量：RNA投入量最多可加12 μL，有利于低浓度模板检测
• 操作简便性：基因组DNA去除与逆转录均设置成mix形式，加样方便，移液误差小

• 出色的逆转录效率，适合不同GC含量、不同表达丰度的基因

图.针对不同GC含量、不同表达丰度的基因，Hifair® Ⅲ SuperMix相对市面同类产品具有更高的逆转录效率.

冰袋运输。-20℃保存。有效期18个月。

Q：Hifair® Ⅲ SuperMix 后续只能用于 qPCR 实验吗？

A：推荐用于qPCR 实验，常规长度基因克隆实验也可以用。

Q：为什么说Hifair® Ⅲ SuperMix 操作误差更小，重复性更好？

A：Hifair® Ⅲ SuperMix 只有 3 个组分，且每个组分的添加体积均超过 1μL，因此移液误差更小，重复性更好。

Q：Hifair® Ⅲ SuperMix 逆转录反应的温度应设置为多少？

A：常规模板 55℃即可，如果是具有复杂二级结构的模板或高 GC 含量的模板，可将温度适当提高至 65℃，有利于提高逆转录效率。

Q：Hifair® Ⅲ SuperMix 操作时可以不进行gDNA 去除这一步吗？

A：可以省略。

Q：为什么 Hifair® Ⅲ SuperMix 更有利于低浓度模板检测？

A：一是该产品增强了与模板的亲和力，二是由于组分的设置，使得 RNA 最大投入量可以达到 12μL，对于低浓度模板可通过增大投入体积来增大模板投入量。