人白介素15 (Human IL-15)是一种广泛表达的14kDa细胞因子,在许多免疫性疾病中发挥着重要作用。它分别与猴科和鼠科IL-15具有约97%和73%的序列同一性。IL-15由单核吞噬细胞(和其他一些细胞)分泌,尤其是被病毒感染后的巨噬细胞。IL-15和IL-2具有相似的生物学功能,IL-15通过与IL-2共用γc受体亚单位,从而刺激T细胞的活化与增殖。IL-15在自身免疫过程(如类风湿性关节炎)和恶性肿瘤(如成人T细胞白血病)中的作用表明,IL-15已作为一种免疫调控的关键性分子受到了广大研究者的重视。
翌圣Human IL-15 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的人白介素15(Human IL-15)。特异性抗人白介素15抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人白介素15与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人白介素15的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 |
97026ES48 / 97026ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
3.9-250 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测物种 |
人 |
检测时长 |
4.5小时 |
灵敏度 |
1.58 pg/mL |
稀释线性 |
83 - 124% |
回收率 |
82 - 116% |
板内差 |
3.2% |
板间差 |
5.8% |
实验数据
IL-15的最低检测限为1.58 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
平均值 |
122.2 |
27.6 |
6.6 |
118.8 |
27.9 |
6.5 |
标准差 |
3.8 |
1.1 |
0.2 |
6.7 |
1.7 |
0.4 |
变异系数(%) |
3.1% |
3.8% |
2.8% |
5.6% |
5.9% |
5.8% |
通过不同水平的IL-15添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
94.3 |
85.6-116.1 |
细胞培养上清 |
99.7 |
82.2-113.3 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
107.6 |
91.2-118.9 |
1:04 |
109.1 |
98.2-124.9 |
1:08 |
107.8 |
100.5-116.3 |
1:16 |
97.4 |
90.1-110.0 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
93.7 |
83.4-107.8 |
1:04 |
95.8 |
86.9-108.1 |
1:08 |
99.3 |
87.4-122.9 |
1:16 |
93.2 |
88.3-102.9 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(pg/mL) |
样本值(pg/mL) |
血清 |
12 |
1.7 |
n.d.-9.4 |
血浆 |
12 |
1.2 |
n.d.-8.6 |
细胞培养上清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得3.9 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组人白介素15。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
||
IL-1α |
IL-6 |
GM-CSF |
IL-10 |
IL-1β |
IL-6R |
IL-1α |
IL-13 |
IL-1ra |
IL-7 |
IL-1β |
IL-15 |
IL-2 |
IL-8 |
IL-2 |
LIF |
IL-2 Rα |
IL-9 |
IL-3 |
MIP-1α |
IL-2 Rβ |
IL-10 |
IL-4 |
MIP-1β |
IL-2 Rγ |
IL-11 |
IL-5 |
SCF |
IL-3 |
IL-12 |
IL-6 |
TNF-a |
IL-4 |
IL-13 |
IL-7 |
|
IL-5 |
|
IL-9 |
|
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
||
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |