产品简介
BsiWI属于Type IIP型限制酶,识别回文序列。经过优化的反应Buffer使BsiWI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,其可增强多种酶的稳定性。
产品信息
货号 |
15211ES75 |
规格 |
300 U |
识别位置 |
5'-C↓GTACG-3' |
酶活 |
10 U/μL |
反应条件 |
1×BsiWI Buffer;55℃孵育 |
失活条件 |
80℃温育20 min |
酶活定义 |
单位活性单位(U)是指在 50 μL反应体系中,55℃ 1 h内可以完全酶切1 µg的p615所需的酶量 |
同裂酶 |
PspLI, Pfl23II |
组分信息
组分编号 |
组分名称 |
15211ES75 |
15211-A |
BsiWI(10 U/μL) |
30 μL |
15211-B |
10×BsiWI Buffer |
1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用说明
1. 体系配制
1)建议冰上操作,按如下加样顺序配制反应体系
组分 |
体积 |
ddH2O |
up to 50 μL |
10×BsiWI Buffer |
5 μL |
底物DNA* |
1 μg |
BsiWI(10 U/μL) |
1 μL |
Total |
50 μL |
*DNA 底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响 Nt.BspQI 酶活性
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 55℃孵育 15~60 min。
4) 80°C孵育20 min即可使酶失活,停止反应,或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
2. 不同DNA中的识别位点数
λDNA |
ΦX174 |
pBR322 |
pUC57 |
pUC18/19 |
SV40 |
M13mp18/19 |
Adeno2 |
1 |
2 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
4 |
3. 甲基化修饰影响
Dam |
Dcm |
CpG |
EcoKI |
EcoBI |
无影响 |
无影响 |
剪切受阻 |
无影响 |
无影响 |
注意事项
1. 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性。
2. 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂 ( 例如甘油、盐 ) 与底物溶液中的污染物 ( 例如盐、EDTA 或乙醇等 ) 相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。
3. 本产品仅作科研用途。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240912