本产品为一种II型限制性内切酶，来源于大肠杆菌(E. coli)表达的球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)内BspQI基因编码的重组蛋白。其识别序列为5'-GCTCTTCN₁/N₄-3'，主要用于酶切质粒以制备poly (A/T/G/C)结尾的线性化DNA片段，获得特定的粘性末端。

 

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
		15202ES76  (500 U)	15202ES86  (2500 U)	15202ES92  (10000 U)
15202-A	BspQI (10 U/μL)	50 μL	250 μL	1 mL

 

单位定义

在50 μL体系中，50℃条件下1 h内消化1 μg λDNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

识别位置

5'······GCTCTTC(N)↓··············3'

3'······CGAGAAG(NNNN)↑······5'

 

产品应用

1) 酶切质粒以制备含有poly(A/T/G/C)末端的线性化DNA片段；

2) 酶切DNA获得特定的粘性末端。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20^oC保存，有效期1年。

 

注意事项

1) 限制性内切酶添加体积不超过反应体积的1/10；

2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；

3) 本产品仅做科研用途！

 

使用方法

该步骤适用于1 μg DNA (≥100 nt)的线性化，可根据实验需要按比例放大。

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液：

组分	体积
质粒DNA	1-2 μg
10 × Digestion Buffer 3	5 μL
BspQI (10 U/μL)	1 μL
RNase-free ddH2O	Up to 50 μL

【注】：10 × Digestion Buffer 3 (Cat#10667)：500 mM Tris-HCl, 1 M NaCl, 100 mM MgCl₂, 1 mg/mL OsrHSA, pH 7.9@25℃

2) 50℃孵育1 h；

3) DNA线性化完成，可继续进行后续实验。

 

HB220607