产品简介

 

UDG（尿嘧啶-DNA 糖基化酶）能催化水解含有尿嘧啶的 DNA 链中的尿嘧啶碱基与糖磷酸骨架间的 N-糖苷键，释放游离的尿嘧啶。本酶可作用于含有 dU 的单链或双链 DNA，对 RNA 无活性。

另外，UCF.ME® Advanced Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG) 经过翌圣生物 UCF.ME®超低残留工艺处理，产品中核酸酶、宿主gDNA等残留极低，适合对背景菌要求更为严格、性能要求更高的应用场景，如支持引物探针提前预混的荧光定量PCR体系的开发等。

 

产品信息

 

货号	14468ES60 / 14468ES76 / 14468ES80 / 14468ES96
规格	500 U / 1000 U / 10000 U / 100000 U
活性定义	以25℃，30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位（U）

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	14468ES60 (500 U)	14468ES76 (1000 U)	14468ES80 (10000 U)	14468ES96 (100000 U)
14468	UCF.ME® Advanced UDG/UNG, 10 U/μL	50 μL	100 μL	1 mL	10 mL

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

 

1. 反应体系（以25 μL和50 μL为例）

组分	体积 (μL)	终浓度
5×PCR Buffer (Mg2+ Plus)	10	1×
25 mM MgCl2	3	1.5 mM
dUTP (10 mM)	3*	0.6 mM
dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)	1	0.2 mM each
模板DNA	Optional	-
引物1 (10 μM)	2	0.4 μM
引物2 (10 μM)	2	0.4 μM
Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	0.5	0.05 U/μL
UCF.ME® Advanced UDG/UNG, 10 U/μL	0.1	1 U/50 μL
ddH2O	Up to 50

*根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。

 

2. 参考扩增程序

反应温度	反应时间	循环数	目的
25℃	10 min*	1	降解含U模板
94℃	2 min	1	UDG酶失活，模板预变性
95℃	10 sec	30-35	变性
60℃	20 sec		退火
72℃	30 sec		延伸
72℃	5 min	1	终延伸

*25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

3. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.

 

注意事项

 

1. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性；

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；

3. 本产品仅做科研用途；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

Ver.CN20250102