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本品是一款双封闭的热启动Taq DNA聚合酶。依托翌圣生物 ZymeEditor™双向分子酶理性设计和定向进化平台,研究人员基于 DNA 聚合酶的结构解析与多来源酶序列比对,通过定点诱变、随机突变定向筛选、压力测试及酶蛋白片段重组等多种技术手段,对 Taq DNA 聚合酶进行全方位定向改造,获得了一系列优势突变体。再结合翌圣生物自主研制的专利抗体产品(产品专利号 - CN202010666417.7)进行双封闭的热启动Taq DNA聚合酶,不仅封闭了Taq DNA聚合酶5'→3'聚合酶活性,同时也封闭了5'→3'核酸外切酶活性。在预变性温度下加热30 sec封闭抗体即可完全失活,释放出 DNA 聚合酶活性和核酸外切酶活性。
该热启动Taq DNA聚合酶采用双封闭抗体,不仅能有效防止错配或引物二聚体引起的非特异性扩增,又能有效抑制探针降解产生的荧光信号下降,双重提升试剂特异性,保障产品在运输或室温使用过程中更加稳定。此外,本品的激活不受缓冲液pH、离子强度等因素的影响,适用于各种基于Taq DNA polymerase的热启动PCR、qPCR反应,常用于从复杂模板(基因组,cDNA)中扩增低拷贝基因,灵敏度高、特异性强,对于低浓度样本检出稳定、荧光值高。
1、特异性强:双封闭热启动酶,双重提高试剂特异性和稳定性;
2、灵敏度高:最低检测限可达5 copies/T;
3、扩增效率优异:扩增模板浓度为5×106 copies/T-50 copies/T时,扩增效率99%,相关性R2=0.99;
4、稳定性强:配制成含引物探针的qPCR全预混体系,在37℃放置14天,反复冻融50次性能不受影响;
5、无核酸酶残留:无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase酶残留 。
1、扩增效率展示
使用10726配制成的qPCR体系,扩增浓度为5×106 copies/T-50 copies/T的非洲猪瘟靶标时具有良好的线性关系,扩增效率达99%,相关性R2=0.99。

图1. 10726配置成的qPCR体系线性测试
2、稳定性展示
使用10726配制成的RT-qPCR体系,在4℃、37℃分别放置14天,和-20℃保存的产品,同时检测4重呼吸道靶标,结果表明该体系能在4℃和37℃稳定保存14天甚至更久,10726稳定性强。

图2. 10726配置成的RT-qPCR体系稳定性测试
-25~-15℃保存,有效期2年。
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